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目的：子宫内膜异位症(endometriosis，EMS)简称“内异症”是一种雌激素依赖性良性疾病，但因其具有“转移、侵袭”等恶性行为而被称为“benign cancer”。其可导致妇女痛经，不孕等且近年来发病率逐年上升，但到目前为止其发病机制尚未完全阐明。众多研究表明二恶英类与内异症的发生及发展有密切关系，且胎儿期的暴露有可能增加成年期的患病风险。我们先期一系列研究表明生长发育期持续暴露四氯二苯并二恶英(TCDD)可以促进小鼠子宫内膜异位症的形成，并且揭示了其通过对免疫系统，细胞因子信号通路，激素等方面的调节作用在内异症的发生和发展中起到了重要作用，研究还发现了内异症在位子宫内膜孕酮受体的缺乏。基因启动子区CpG岛超甲基化与基因表达沉默有关，DNA甲基转移酶-1（DNMT-1）在此过程中起到了重要作用。目前有关二恶英的研究中发现了其具有甲基化的调节作用。本研究的目的旨在通过探讨TCDD暴露下小鼠EMS模型在位子宫内膜孕酮受体A（PR-A），孕酮受体B（PR-B）与DNMT-1的表达及PR-A和PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度的关系，进一步从表观遗传学的角度探讨二恶英在内异症发生和发展机制中的作用。方法：1TCDD暴露小鼠EMS模型建立将60只C57BL/6雌性小鼠与30只C3H雄性小鼠随机合笼交配，见到阴道栓为受孕当日，于受孕第8天将60只已孕母鼠随机分为原对照组(TCDD：0ug/kg)和原暴露组(TCDD：3ug/kg)，原对照组所产雌性子鼠于生后21天暴露不同剂量的TCDD并随机分为两个处理组分别为(生前/生后)：0/0，0/3，原暴露组所产子鼠选择于生后21天暴露不同剂量TCDD并随机分为三个处理组分别为(生前/生后)：3/0，3/3，3/10，每组均为12只。除0/0组外出生后49天每个处理组再次给予3ug/kg TCDD，生后第70天给予3ug/kg TCDD并实施自体子宫内膜移植术构建小鼠子宫内膜异位症模型，术后3，6，9周各暴露一次TCDD(3ug/kg)，术后12周取阴道脱落细胞涂片将处于动情前期雌性子鼠脱臼处死。这样依据雌性子代整个发育阶段所暴露TCDD的剂量分为5组，分别为0/0(对照组)，0/3（青春期+成年期暴露组），3/0（胎儿期+成年期暴露组），3/3（胎儿期+青春期+成年期普通剂量暴露组），3/10(胎儿期+青春期+成年期高剂量暴露组)。2PR-A、PR-B及DNMT-1的检测建模术后12周将所有处理组的小鼠脱臼处死，取其在位子宫内膜组织制成蜡块保存，本次实验研究用保存的蜡块组织利用免疫组化SP法检测在位内膜组织中DNA甲基转移酶-1（DNMT-1），孕酮受体A(PR-A),和孕酮受体B(PR-B)的表达。甲基化特异性PCR（MSP)方法检测PR-A和PR-B基因启动子区CpG岛的甲基化程度。3所有数据采用SPSS19.0软件进行统计学分析。计量资料以ⅹ±s表示，采用多个样本均数比较的方差分析，计数资料采用Fisher确切概率法，P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1不同处理组小鼠在位子宫内膜组织中DNMT-1、PR-A、PR-B的表达，各组中以上三个指标数据均经过方差齐性检验，符合方差分析条件，采用完全随机设计资料的方差分析，并采用LSD-t检验进行多个样本均数间的多重比较。DNMT-1在0/0组与0/3组中的表达经比较无显著性差异（P=0.189>0.05）；在0/0组与3/0组的表达经比较无显著性差异（P=0.209>0.05）；而在0/0组与3/3组的表达经比较具有显著性差异（P=0.000<0.05），其在3/3组中的表达高于其在0/0组中的表达；3/3组与3/10组的表达经比较具有显著性差异（P=0.000<0.05），其在3/10组中的表达高于其在3/3组中的表达。PR-B在0/0组与0/3组的表达经比较无显著性差异（P=0.156>0.05）；在0/0组与3/0组中的表达经比较无显著性差异（P=0.096>0.05）；在0/0组与3/3组的表达经比较具有显著性差异（P=0.000<0.05），其在3/3组中的表达低于其在0/0组中的表达；在3/3组与3/10组的表达经比较具有显著性差异（P=0.000<0.05），其在3/10组中的表达低于其在3/3组中的表达。各组中PR-A的表达经比较无显著性差异。2各组子宫在位内膜PR-A,PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度的比较。PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度0/0组与0/3组相比无显著性差异(P=0.295>0.05)；0/0组与3/0组相比无显著性差异(P=0.077>0.05)；而0/0组与3/3组相比有显著性差异，且3/3组高于0/0组(P=0.014<0.05)；3/3组与3/10组相比有显著性差异，且3/10组高于3/3(P=0.019<0.05)。而各组中PR-A基因启动子区CpG岛甲基化程度无显著性差异。3相对应同一组别中除对照组PR-A与PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度相同，而其余各组中同组PR-B基因启动子区CpG岛甲基化程度均高于PR-A。且相对应同组中动情前期小鼠子宫内膜组织中PR-A的表达较强于PR-B，并随着TCDD持续暴露剂量的增加，PR-A的表达逐渐占据更明显的主导地位。结论：1胎儿期，青春期及成年期持续暴露不同剂量TCDD有可能上调在位子宫内膜DNMT-1的表达，下调PR-B的表达，并且随剂量的增加其作用会增强。对PR-A的表达却无明显影响。即在TCDD构建的小鼠内异症模型中在位子宫内膜组织中DNMT-1表达的增强主要引起PR-B表达的下降。2胎儿期，青春期及成年期持续不同剂量TCDD的暴露有可能通过上调在位子宫内膜DNMT-1的水平使PR-B基因启动子区CpG岛发生超甲基化改变，导致PR-B在组织中表达下降。而对PR-A基因启动子区CpG岛甲基化程度无影响。3不同发育阶段TCDD持续暴露潜在影响成熟期子宫内膜的生物学功能从而导致在位子宫内膜细胞局部对激素反应的改变及增殖分化状态的改变，这些可能促进了成年期子宫内膜异位症的发生与发展。