疼痛是临床上常见的症状。在神经系统中不仅有痛觉信息的传递系统，而且存在复杂的痛调制网络。一般认为，中脑导水管周围灰质、延脑头端腹内侧核群（中缝大核及邻近的网状结构）、一部分脑桥背外侧网状结构（蓝斑核群和KF核）均参与痛感知及痛调制过程。最近的研究发现，痛信息可经脑干网状结构，中脑中央灰质，下丘脑，再至边缘前脑结构，形成复杂的联系通路。这些区域在痛情感、痛经验及痛行为方面起重要作用。海马是边缘系统的重要组成部分，除与学习、记忆、情绪有关外，还与痛感知及痛调制有关。皮下注射甲醛溶液可引起海马痛兴奋神经元（pain exciting neuron）和痛抑制神经元（pain inhibitory neuron）放电频率改变；外周皮下注射甲醛溶液可引起大鼠海马内5-HT、FOS表达增加和IL-2mRNA表达上调，表明海马神经元参与了伤害性信息的感知，并且其功能和代谢发生了改变。另有研究证实，电刺激海马可以引起大鼠痛阈升高；海马内注射谷氨酸钠可产生镇痛效应，并引起内源性镇痛系统中5-HT水平升高。大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)注射竞争性N-甲基-D-天门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA）受体拮抗剂AP5能够显著减轻皮下注射甲醛引起的痛行为反应 ，以上资料表明海马除参与伤害性信息感知外，还参与痛调制。 <WP=5>一氧化氮(nitrc oxide,NO)是中枢神经系统内重要的信息分子，其在中枢痛调制方面的作用已有一些研究，例如：小鼠侧脑室微量注射NO合酶（nitrc oxide synthase,NOS）抑制剂硝基左旋精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME)后表现明显的镇痛效应，这种镇痛作用可被静脉注射L-精氨酸（L-arginine, L-Arg）逆转；而也有作者报道，脑室内注射L-Arg也可产生明显的镇痛作用，而NOS抑制剂可有效拮抗该效应。可以看出，这些研究结果并不一致。中枢内多个核团均存在NOS阳性神经元，不同核团在痛调制方面的作用并不相同，所以脑室内给药不能反映某一核团中NO的作用。海马内存在着NOS阳性神经元，当外周伤害性信息传入时，海马内NOS表达是否发生改变，尚未见报道。因此，本研究观察了大鼠甲醛炎性痛时，海马NOS活性表达的变化，并观察了其区域分布特征和时间特征。在此基础上，鞘内给予NMDA受体拮抗剂MK-801，观察其对甲醛诱导的海马NOS活性表达及NO含量的影响。1 甲醛炎性痛时大鼠海马NOS表达及NO含量的变化健康雄性Sprague-Dawley大鼠84只，体重260-280克，随机分为6组，分别为：①对照组，②甲醛6ｈ组，③甲醛12ｈ组，④甲醛24ｈ组，⑤甲醛48ｈ组，⑥甲醛72ｈ组。每组14只动物，其中7只用于观察NOS的表达，7只用于观察NO含量的变化。其中对照组不加任何处理,直接多聚甲醛灌注固定、取材或直接断头取材；甲醛6ｈ、12ｈ、24ｈ、48ｈ、72ｈ组分别于注射甲醛后不同时间,多聚甲醛灌注固定、取材或直接断头取材。用NADPH-d组织化学法观<WP=6>察大鼠海马NOS表达的变化；应用硝酸还原酶法测定NO终产物（NO3-/NO2-）的含量来反映NO含量的变化。NADPH-d阳性结果的观察测定，从每例动物脑组织切片中随机抽取10张切片，于光学显微镜下进行观察。分别计数海马CA1、CA3区和DG的NADPH-d阳性神经元数目。借助HPLAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统软件，分别测定海马CA1、CA3区和DG的NADPH-d阳性神经元的灰度值，数值越小，染色越深。 结果发现，正常对照组大鼠，海马内分布着一定数量的NADPH-d阳性神经元, 这些NADPH-d阳性神经元胞浆及突起可被染成蓝色,胞核淡染，散在分布于CA1、CA3区及DG各层，细胞数量均较少，染色较浅。足底注射甲醛6ｈ后，海马内各区及齿状回NADPH-d阳性神经元数量均明显增加(P＜0.01)，染色明显加深，即灰度值明显降低(P＜0.01)，并且海马组织中NO含量显著增加（P＜0.01）；海马中NOS活性表达增加及NO含量增加以注射甲醛后12ｈ最为明显（P＜0.01）；注射甲醛后48ｈ，NADPH-d阳性神经元数量、染色深度及海马NO含量均有所降低；至72ｈ降至对照组水平。两侧海马各区及齿状回比较，无论阳性神经元数量，阳性神经元染色深度及海马组织NO含量均无显著性差异。以上结果表明，甲醛炎性痛可诱导海马NOS活性升高，NO含量增加，提示外周伤害性信息可以上传入海马，并引起海马神经元内NO产生增多。2 鞘内注射NMDA受体拮抗剂MK-801对甲醛炎性痛大鼠海马NOS表达及NO含量的影响健康雄性Sprague-Dawley大鼠56只，体重260-280克，<WP=7>随机分为4组，分别为：①对照组，②甲醛12ｈ组，③甲醛+生理盐水组，④甲醛+MK-801组。每组14只动物,其中7只用于观察NOS的表达，7只用于观察NO含量的变化。对照组不加任何处理,直接多聚甲醛灌注固定、取材或直接断头取材；甲醛12ｈ组、甲醛+生理盐水组、甲醛+MK-801组均于注射甲醛后12小时后多聚甲醛灌注固定、取材或直接断头取材，其中甲醛+生理盐水组、甲醛+MK-801组分别于注射甲醛前15分钟鞘内注射10μl生理盐水和MK-801溶液。采用NADPH-d组织化学法观察大鼠海马NOS的表达；应用硝酸还原酶法测定NO的含量。NADPH-d阳性神经元的计数及染色深度的测定同前。结果发现，注射甲醛后，动物即出现舔、咬、摇动注射侧脚掌