猪高热病主要病原HP PRRSV的病原学研究

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猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。该病自发现以来给我国养猪业造成了巨大的经济损失,近几年来我国大部分地区夏秋季出现猪的高热病,我国农业部2007年确定引起高热病的主要病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株,本研究在对高热病进行流行病学调查的基础上,主要对引起猪高热病主要病原高致病性猪繁殖与呼吸综合征病的病原学进行研究,并做了以下方面的工作:本研究自2006年5月至2007年10月,通过对江苏、北京、河北、云南、安徽、湖北范围内41个规模化养猪场各个阶段猪群现场随机采集、送样的方式来收集猪的血样和病料,用RT-PCR和ELISA方法进行抗原、抗体检测,并分析结果。临床症状调查发现:近两年来PRRS发病猪有神经症状,胃部和膀胱有出血现象,这可能是有些变异株引起的异常临床症状。RT-PCR检测,209份疑似病料检测出120份阳性,阳性率为57.42%。对615份来自18个PRRS疫苗免疫猪场的血清样品进行ELISA PRRSV抗体检测,PRRSV抗体阳性率在80.26%~87.50%之间,平均阳性率为84.39%。母猪的PRRS阳性率均达到86%以上。育肥猪群的阳性率比较高,达84.38%。哺乳仔猪的PRRS阳性率较高达83.51%。断乳仔猪的阳性率比其它免疫猪群低,平均阳性率为71.03%。对23个PRRSV疫苗未免疫猪场835份血清PRRSV抗体检测,阳性率在68.86%~82.78%之间。母猪的PRRS阳性率均达到80%以上。育肥猪群的阳性率比较高,达72.65%。哺乳仔猪的PRRS阳性率较高,达76.98%。断乳仔猪的阳性率也比其它非免疫猪群低,平均阳性率为68.86%。总体来看,无论是免疫猪场还是非免疫猪场PRRS的阳性率都很高,由此可推断PRRS今后可能成为影响我国养猪业的主要疫病之一。选取流行病学调查检测的4株猪繁殖与呼吸综合征病毒作为研究对象,经对病毒的细胞培养特性的测定、血清学试验、病毒基因鉴定等方法,确定4株为美洲型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。病毒细胞培养特性测定表明,4株病毒均不耐酸碱和热。序列分析可见:4株分离株的ORF5基因序列没有改变,和标准株VR-2332同源性为100%。Nsp2部分基因序列可见:分离的4株病毒均存在30个氨基酸缺失。4株分离株与国内使用的疫苗株VR-2332、RespPRRSReproMLV、CH-1a、RespPRRS MLV的同源性很低,为57.4%~82.4%;与国内分离的变异株JXAI、HB-1(sh)/2002、HUN4、hunan-1、YS0608、YNYXI、YNYX3、ZJCJ的同源性很高,为88.2%~98.5%;4株之间的同源性为99.3%~100%。氨基酸序列系统发育树显示:所有毒株分为2个大的分支,每个大分支又有不同的小分支。本研究所获得的流行毒株JS-1、JS-2、JS-3、JS-4和国内目前使用的疫苗株VR2332、CH-1a、RespPRRS Repro MLV、RespPRRS MLV属于不同的分支,遗传距离较远;和国内分离的变异株HUN4、JAXI、jiangxi-2、YS0608、ZJCJ属于同一分支,有较近的亲缘关系,由此说明所分离的毒株可能是变异株,不是疫苗株演化而来。本研究用分离的4株高致病性PRRSV毒株人工感染仔猪,以复制出高致病性PRRSV的特征症状。感染猪经临床症状观察,剖检病理变化,抗原、抗体检测,病毒分离,可说明成功复制出了PRRSV,证明了柯赫定律,各毒株的发病机理和致病力还有待于进一步研究。
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