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本研究分为二部分：
第一部分、α2-肾上腺素能受体激动剂右旋美托咪啶引起小鼠脑内EGFR间接激活EGFR间接激活包括两个阶段：第一阶段，Gj蛋白同源三聚体βγ亚单位激活，通过激活蛋白激酶C(PKC)和细胞质内Src酪氨酸激酶，使金属蛋白酶介导的EGFR配体从跨膜前体外功能区域脱落释放。第二阶段，脱落释放的上皮生长因子受体(EGFR)配体主要是HB-EGF，激活同一细胞或相邻细胞上的EGFR，如EGFR酪氨酸激酶(RTK)磷酸化，从而导致ERK磷酸化。
右旋美托咪啶是α2-肾上腺素能受体激动剂，它与α2-肾上腺素能受体特异性结合力是与α1-肾上腺素能受体结合的1600倍，也比可乐定高出几倍，能激活α2-肾上腺素能受体的三个亚型（α2A、α2B、α2C受体）。浓度在25～500 nM的右旋美托咪啶可以引起小鼠星形胶质细胞ERK1/2磷酸化，也能引起EGFR磷酸化，EGFR酪氨酸激酶抑制剂AG1478、Zn2+-依赖性金属蛋白酶抑制剂GM6001和HB-EGF拮抗剂肝素能抑制其引起的EGFR和ERK1/2磷酸化，表明它们都参与间接激活途径。在小脑颗粒神经元右旋美托咪啶不能引起ERK1/2磷酸化，也无钙离子浓度升高，表明在谷氨酸能神经元缺少突触后α2-肾上腺素能受体表达。然而用右旋美托咪啶处理星形胶质细胞，收集其培养液能引起神经元ERK1/2磷酸化，说明此过程有EGFR配体释放。在体内HB-EGF能促进小脑颗粒神经母细胞增殖，EGF能引起培养的小脑颗粒神经元ERK磷酸化升高，说明小脑颗粒神经元上存在EGFR的表达。
在培养的星形胶质细胞右旋美托咪啶能引起EGFR间接激活，但在整体脑内右旋美托咪啶是否具有同样作用。我们将研究：1）腹腔注射右旋美托咪啶是否引起小鼠脑内EGFR和ERK1/2磷酸化。2）EGFR和ERK1/2磷酸化是否被EGFR酪氨酸激酶抑制剂AG1478、Zn2+-依赖性金属蛋白酶抑制剂GM6001和HB-EGF拮抗剂肝素所抑制。
方法：
成年雄性CD-1小鼠，腹腔注射右旋美托咪啶，7min、15min或30min断头，取出脑组织在裂解液中匀浆。侧脑室注射AG1478、GM6001或肝素其中一种抑制剂后，腹腔注射右旋美托咪啶15min后断头，脑组织在裂解液中匀浆。匀浆后的样品进行免疫凝胶电泳和Westem印迹法半定量检测ERK1/2磷酸化和EGFR磷酸化，以及EGFR磷酸化位点。使用SPSS10.0软件进行统计学分析，多组资料用one-way ANOVA方法进行比较，P
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