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目的:本研究旨在检测NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)依赖性蛋白脱乙酰酶Sirtuin-6(SIRT6)在胃癌组织和相应癌旁组织以及正常胃黏膜上皮细胞和各种胃癌细胞系中的表达差异,探索SIRT6在胃癌发生过程中的作用及其分子机制,为胃癌患者的预后判断及靶向治疗提供新的见解和理论基础。方法:运用肿瘤公用数据库Oncomine分析SIRT6在胃癌组织中的mRNA表达情况,Kamplot(Kaplan-Meier Plotter)网站分析胃癌中SIRT6表达量与患者预后的关系;采用Western blotting技术、qPCR和IHC方法检测SIRT6在胃肿瘤组织与癌旁组织中的差异表达;应用Western blot检测SIRT6在正常胃粘膜上皮细胞和胃肿瘤细胞系中的表达量;运用RNAi技术和基因过表达技术,结合细胞的瞬时转染技术,构建SIRT6沉默或者过表达细胞模型;CCK8细胞增殖实验和平板克隆形成实验检测胃肿瘤细胞的增殖情况,Transwell实验评价细胞的迁移能力;CCK8实验和Western blot同时检测肿瘤细胞的化疗药物敏感性;通过Western blot方法进一步探讨差异SIRT6表达对于胃癌细胞上皮间质转化(EMT)、肿瘤干细胞样特性(CSC)发生以及相关信号通路的影响等。结果:数据库分析以及IHC、qPCR和Western blot检测结果均显示:胃癌组织中的SIRT6表达量显著高于邻近的癌旁组织,各胃癌细胞系中均有不同程度的SIRT6高表达,高表达SIRT6的胃癌患者的总体生存率和无病生存率均低于低表达患者;在SGC-7901细胞中,过表达SIRT6促使胃癌细胞的迁移能力增强,增殖速度增快和克隆形成能力增强,细胞的化疗药物敏感性降低;SIRT6过表达后SGC-7901细胞的EMT和CSC进程均表现为不同程度的增强,EMT表现为上皮细胞表面标志物(E-cadherin)表达量的减少、间质细胞表面标志物(N-cadherin,Vimentin,Twist1,Snail)的增加,CSC表现为多种肿瘤干细胞标志物(CD133,Sox2,Oct4,Nanog)表达量的显著增加。TGFβ通路检测结果显示,SIRT6过表达促进了SGC-7901细胞TGFβ通路关键蛋白的表达,表现为TGFβ1和P-SMAD2/3的表达量的增加。RNAi抑制MGC-803细胞SIRT6表达后,细胞表现为迁移能力减弱和增殖速度的减慢;细胞的EMT、CSC特性的抑制和细胞的药物敏感性增强;TGFβ通路的检测结果显示TGFβ1及调控的下游P-SMAD2/3,P-ERK1/2蛋白的表达量减少。结论:SIRT6可能在胃癌的进程中发挥一定的致癌作用。SIRT6可能通过激活TGFβ相关通路诱导胃癌细胞EMT和CSC特性发生,从而促进肿瘤细胞的增殖、转移和化疗药物抵抗。SIRT6将有望成为评估胃癌转移和预后的潜在指标,并且为胃癌的治疗提供新的思路。