CD34~+细胞联合雪旺细胞移植对脊髓全横断大鼠后肢功能及移植细胞分化的研究

来源 :昆明医学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:kang573
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[目的]:讨论CD34~+细胞和雪旺细胞及其联合移植对脊髓全横断损伤大鼠的后肢运动及感觉功能的情况,并探讨移植细胞在体内的存活、迁移、分化及表型变化情况。[方法]:①实验过程:健康雌性SD大鼠60只,随机分为纯手术对照组、免疫对照组、CD34~+细胞移植组、雪旺细胞移植组和CD34~+细胞联合雪旺细胞移植组,每组12只。ICR小鼠(6~8周龄)2只,取其骨髓用于体外培养CD34~+细胞。ICR新生鼠(1~2天)30只,取其坐骨神经用于体外培养雪旺细胞。大鼠脊髓全横断术(T9、T10椎骨之间全横断脊髓)后2周,将体外培养并标记好的细胞经多点注射入横断瘢痕及瘢痕上下各一个脊髓节段,单独移植组每只大鼠移植60万个细胞,联合移植组每只大鼠移植120万个细胞。移植后使用免疫抑制剂。术后1~12w、16w、20w、24w行BBB评分,并于12w和24w行热痛阈值和机械痛阈值的测定。术后4w、8w、12w灌注取材观察体内移植细胞的存活、迁移、分化及表型变化情况。②实验评估:在各时间点对大鼠进行运动及感觉功能评测,并取材观察体内移植细胞情况,进行免疫组织化学鉴定细胞的存活、迁移、分化及表型变化情况。[结果]:①运动功能:在移植后3个月以内,CD34~+细胞单独移植效果较好,3个月后,联合移植效果比CD34~+细胞单独移植效果好。②感觉功能:痛觉恢复比温觉要好,各组均发现随时间增加而痛觉逐步改善,但温觉没有变化。③存活:CD34~+细胞在有雪旺细胞存在的情况下存活较多,在第3个月尤为明显。④迁移:CD34~+移植细胞在3个月内有不同程度的迁移。⑤分化:Neu-N、GFAP均呈现联合组比单独组分化率高的特点;O4随时间增加,分化率降低,APC呈相反的变化。⑥雪旺细胞表型变化:移植后3个月内,雪旺细胞的GFAP表达逐渐增高。[结论]:1,CD34~+细胞联合雪旺细胞移植对脊髓全横断大鼠后肢功能及感觉功能恢复比单独移植细胞效果好;2,移植后的CD34~+细胞在损伤部位能长期存活,迁移并且向神经元样及胶质细胞样分化;3,移植后的雪旺细胞GFAP表达逐渐增高。
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