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目的:
观察天麻素注麻射液对神经病理性疼痛模型大鼠的行为学及背根神经节内生长相关蛋白43(growth associated protein,GAP-43)表达的影响。
方法:
实验分两部分进行,实验第一部分,采用坐骨神经结扎损伤(Chronic constriction iniury,CCI)建立神经病理性疼痛大鼠模型。75只SD大鼠,随机分为三组(n=25)。对照组(Con组):不接受任何手术操作;假手术组(Sham组):只分离坐骨神经,不予以结扎;手术组(CCI组):结扎坐骨神经。于术前1、2d,术后1、3、5、7、10、14、21、28d测定各组大鼠热缩足反射潜伏期(TWL),机械缩足反应阈值(MWT),并于术后第3、7、14、21、28天各组随机抽取5只大鼠处死,应用免疫组织化学和图像分析的方法研究背根神经节中GAP-43的表达并进行半定量分析。实验第二部分,100只SD大鼠,全部给予坐骨神经结扎后随机分为4组,每组25只。对照组(CCIN组):坐骨神经结扎后,给予注射生理盐水0.5ml/d,连续两周;天麻素Ⅰ组(GasⅠ组):坐骨神经结扎后腹腔注射天麻素注射液50mg·kg-1·d-1连续两周;天麻素Ⅱ组(GasⅡ组):坐骨神经结扎后腹腔注射天麻素注射液100mg·kg-1·d-1连续两周;天麻素Ⅲ组(GasⅢ组):坐骨神经结扎后腹腔注射天麻素注射液150mg·kg-1·d-1连续两周。观察的指标及观察时点同实验第一部分。
结果:
1.MWT和TWL:与Con组和Sham组比较,CCI组的大鼠术后出现MWI和TWL的明显缩短(P<0.01和P<0.05);Con组与Sham组比较,相同时间点其MWT和TWL差别无统计学意义(P>0.05);CCIN组比GasⅠ、Ⅱ、Ⅲ组术后各时间点的TWT均明显延长(P<0.01和P<0.05),但MWL差别无统计学意义(P>0.05);GasⅠ、Ⅱ、Ⅲ各组之间比较其MWT和TWL差别无统计学意义(P>0.05)。
2.背根神经节内GAP-43的表达:Con组和Sham组见少量GAP-43阳性细胞的表达,CCI组与Con组和Sham组比较其大鼠术后出现了GAP-43的表达明显增加(P<0.01),且其表达在术后第3天开始增高,在14天达到高峰;以后又逐渐下降; GasⅠ、Ⅱ、Ⅲ组和CCIN组比较,术后各时间点背根神经节内GAP-43的表达均明显减少(P<0.05);GaSⅠ、Ⅱ、Ⅲ各组之间比较其GAP-43的表达差别无统计学意义(P>0.05)。
结论:
1.腹腔注射天麻素注射液能够明显减轻坐骨神经慢性压迫性损伤后的热觉过敏,对机械性痛觉过敏无明显影响。
2.GAP-43与神经病理性疼痛的发生关系密切。坐骨神经慢性压迫性损伤的神经病理性疼痛的模型中,背根神经节内GAP-43表达比正常组明显增加,提示GAP-43可能参与了神经病理性疼痛的分子机制形成。
3.对神经病理性疼痛大鼠持续应用天麻素注射液能有效抑制背根神经节中GAP-43的高表达,使其维持在较低水平,从而有效地抑制神经病理性疼痛的发生和发展。