APEC和UPEC分离株tRNA--pheV位点基因组岛致病性的初步研究

来源 :扬州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangxiangbin
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大肠杆菌是存在于人和动物肠道内的正常菌群,该物种由非致病性菌株和具有潜在致病潜能的致病性菌株组成,可引起机体肠道感染和肠道外感染。鸡致病性病大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)是造成全球养鸡业经济损失的罪魁祸首。影响家禽的致病性大肠杆菌菌株通常属于某些血清群,特别是O1、O2和O78。尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)是引起泌尿系统感染的主要病原之一,主要危害女性健康,能够引起人的膀胱炎、急性肾盂肾炎等泌尿系统疾病。作为肠道外致病性大肠杆菌,APEC和UPEC二者在血清型、毒力基因、致病能力、系统发生树的分布位置和全基因组序列同源性等很多方面存在相似性,因此有观点甚至认为APEC和UPEC互为禽大肠杆菌病和人尿道感染的来源。  毒力岛(pathogenicity island,PAI)最初是在人尿道致病性大肠杆菌中发现的,后来随着研究的深入,将和毒力岛有相似结构但具有其他功能的岛统称为基因组岛(genomic island,GI)。毒力岛的形成是细菌通过基因组水平转移,从一种病原菌转移到另一种细菌中,细菌的遗传物质亦随之从这种基因组转移到另一种细菌,并构成新的基因组岛或毒力岛,使细菌在短期内发生质和量的变化,产生许多新的变种,这种演变是细菌进化的关键,越来越多的研究表明毒力岛与细菌的致病性密切相关。  以APEC优势血清型E058O2、E516O1、E522O78和UPEC U17O2为研究对象,通过APEC和UPEC位于相同tRNA-pheV位点后PAI定位分析及验证,发现了E058、E516、E522和U17菌株位于tRNA-pheV位点后PAI。通过比较分析发现E516、E058和U17菌株同源性较高,主要编码tia、ireA、P菌毛基因簇和磷酸甘油盐转运蛋白(pgt),E522菌株除编码P菌毛基因簇和磷酸甘油盐转运蛋白(pgt)外,还编码肠道病毒Gp2蛋白和溶血素表达调节等相关蛋白。  运用九Red重组方法成功构建E058、E516、E522和U17PAI突变株E058ΔPAI∷cat、E516ΔPAI∷cat、E522ΔPAI∷cat和U17ΔPAI∷cat。体外培养生长曲线结果显示E058、E516、E522和U17突变株与野生株相比生长速度无变化。1日龄鸡LD5o试验结果显示,突变株比野生株毒力下降,各野生株和突变株LD50值分别为,E058:104.428,E058ΔPAI∷cat:105.267,E516:103.24,E516ΔPAI∷cat:104.257,E522:105.64,E522ΔPAI∷cat:107.502,U17:104.15,U17ΔPAI∷cat:104.816。35日龄SPF鸡体内定植与持续试验结果显示,各脏器载菌量突变株E058ΔPAI∷cat、E516ΔPAI∷cat、E522ΔPAI∷cat和U17ΔPAI∷cat比野生株降低,突变株E058ΔPAI∷cat、E516ΔPAI∷cat在鸡体内各脏器载菌量比野生株显著降低,突变株E522ΔPAI∷cat在鸡体内各脏器载菌量比野生株极显著降低,U17ΔPAI∷cat突变株在鸡体内各脏器载菌量与野生株相比有差异。小鼠尿道感染试验结果显示,E058突变株比野生株在肾脏、膀胱和尿液中的载菌量极显著下降,U17突变株比野生株在肾脏、膀胱和尿液中的载菌量显著下降。E058和U17突变株的LD5o试验毒力下降水平与体内定居试验和小鼠尿道感染试验各脏器载菌量差异并不完全一致;体外培养MSHA和MRHA试验E058、E516、E522和U17突变株比野生株血凝效价稍低;电镜观察除E522突变株菌体表面菌毛比野生株略有减少外,其它菌株野生株和突变株结构未发现明显差异。
其他文献
期刊
目前,大多数企业特别是中小型企业仍然把财务工作重心放在比较传统的财务账目处理上,会计人员通常关注的是基础性的会计工作,企业则更加看重数据的真实性、账务的严谨性以及
期刊
期刊
期刊
期刊
学位
人们在经历了20世纪的革命与斗争洗礼后,已经深刻认识到,如果我们不能够用社会主义的民主联合,来有效地控制和监督公共权利行使机构及其公职人员,那么“社会公仆变为社会主人
期刊
期刊