【摘 要】
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目的:研究人成纤维细胞生长因子10(FGF10)诱导脂肪干细胞分化的机制,并为临床以增脂为主要手段的组织工程和临床整形美容及创伤修复提供思路和方法。方法:1、分离,培养从外科
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目的:研究人成纤维细胞生长因子10(FGF10)诱导脂肪干细胞分化的机制,并为临床以增脂为主要手段的组织工程和临床整形美容及创伤修复提供思路和方法。方法:1、分离,培养从外科手术术中物理分离得到的脂肪干细胞,并通过定向分化诱导等方法鉴定其干细胞特性。2、从人肺组织中抽提总RNA,并利用RT-PCR扩增FGF10,构建pcDNA3.0-FGF10重组质粒,并将其转染至MSC中,利用IHC, ELISA, RT-PCR和western-blotting的方法鉴定pcDNA3.0-FGF10-MSC表达目的蛋白FGF10的情况。3、利用pcDNA3.0-FGF10-MSC与ADSC体外共培养及裸鼠体内注射细胞的方法证明FGF10的促成脂作用,通过显微镜观察细胞改变及RT-PCR和real-time PCR监测ADSC分化过程中转录因子的变化。通过取裸鼠皮下组织切片染色及免疫组化证实FGF10的体内作用。结果:1、我们培养的ADSC具有干细胞特性,并能多向诱导分化。2、构建的pcDNA3.0-FGF10-MSC表达载体能持续表达目的蛋白FGF10。3、体外共培养实验发现ADSC细胞内脂滴增多,分化转录因子表达增高。裸鼠体内实验发现皮下脂肪层明显增厚。结论:FGF10能在体外及体内促进脂肪干细胞的成熟分化。
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