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目的： 建立一种特异、灵敏的快速检测海产品中副溶血性弧菌及其毒力基因的方法，并用于海产品中副溶血性弧菌的快速检测。 方法： 1.直接分离检测法:制备副溶血性弧菌ATCC338471×100～1×106cfu/ml菌液，取各浓度菌液1ml直接用TCBS平板进行划线分离，每一浓度平行三份。对疑似菌落纯培养后进行生化鉴定和毒力试验。记录实验时间。 2.国标(GBT4789.7-2008)检测法:制备副溶血性弧菌ATCC338471×100～1×107cfu/ml浓度菌液，37℃增菌8h后，取各浓度增菌液1ml用TCBS平板进行划线分离，平行三份。对疑似菌落纯培养后进行生化鉴定和毒力实验。记录实验时间。 3.直接PCR检测法:制备副溶血性弧菌ATCC338471×100～1×106cfu/ml浓度菌液，取1ml菌液，提取基因组DNA，用特异性引物进行PCR，检测副溶血性弧菌种特异性基因tlh和毒力基因tdh。记录实验时间。 4.快速检测法:振荡培养增菌结合PCR法。取副溶血性弧菌ATCC338471×100～1×106cfu/ml菌液1ml，加入到200ml碱性蛋白胨水中，37℃150rpm振荡培养3h。分别取1ml增菌液提取细菌基因组DNA，PCR检测种特异性基因tlh和毒力基因trh、tdh。 5.快速检测法检测模拟样本中副溶血性弧菌:制备副溶血性弧菌ATCC33847污染牡蛎的模拟样本，形成2.5×105、2.5×104、2.5×103、2.5×102、2.5×101、2.5×100、2.5×10-1cfu/ml浓度梯度带菌量，37℃150rpm振荡培养3h后，取1ml菌液，提取基因组DNA，用特异性引物进行PCR，检测副溶血性弧菌种特异性基因tlh和毒力基因tdh。记录实验时间。 6.快速检测法检测市售海产品中副溶血性弧菌:购买温州市售海产品160份，用快速检测法检测副溶血性弧菌。同时用国标法、直接PCR法检测。 结果： 1.直接分离检测法:检测副溶血性弧菌ATCC33847，检测下限为1×104cfu/ml。实验需24h，生化鉴定及毒力实验需48h。 2.国标法(GBT4789.7-2008):检测副溶血性弧菌ATCC33847，检测下限为1×103cfu/ml。实验需36h，生化鉴定及毒力实验需48h。 3.直接PCR法:检测副溶血性弧菌ATCC33847 tlh和tdh基因，检测下限为1×102cfu/ml。实验需3～4h。 4.快速检测法:检测副溶血性弧菌33847 tlh和tdh基因，检测下限为1×100cfu/ml。实验需8h。 5.快速检测法检测模拟样本:检测下限为2.5×100cfu/ml。实验需8h。 6.快速检测法检测市售海产品中VP:快速检测法检测温州市售160份海产品，检出VP阳性110份，检出率68.8％;110份标本检出携带VP毒力基因35份(31.8％)，其中trh+23份，tdh+12份。国标法VP检出率40.0％（64份），直接PCR法VP检出率48.8％（78份）。 结论： 振荡培养增菌结合PCR法的快速检测法，特异性强，敏感性高，操作简单，稳定性好、耗时短，适用于海产品中副溶血性弧菌的快速检测。