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氨氮是水产养殖的重要环境胁迫因子,本实验采用96 h静水停食方法对大口黑鲈幼鱼进行了氨氮急性毒性试验的基础上,得到了大口黑鲈幼鱼在96 h总氨氮半致死浓度。基于96 h大口黑鲈幼鱼的半致死浓度设计了对照组（A组0 mg/L）和氨氮胁迫组（B组30 mg/L）在胁迫24 h后每组随机选取3条鱼解剖并混合每个个体的肝、肾、鳃、脑、肌肉和肠等组织进行转录组测序,测序共获得335539个Transcripts,154485个unigenes,差异基因5680条,其中上调的2801条下调的2879条,上调的差异基因富集程度最高的几个通路都为与氨基酸代谢有关的通路,而下调的差异基因富集程度最高的几个通路都为信号转导通路,其中Ras信号通路上差异基因富集程度最高,TCR在Ras信号通路中具有重要作用。对氨氮胁迫下的大口黑鲈中TCR的表达量进行分析,结果发现TCR表达量明显下降。氨氮胁迫使大量外源NH3经过鳃和皮肤大量涌入并在组织中积累,使鱼的免疫系统受到损害,TCR受到抑制从而影响T细胞的活化,TCR的减少抑制了ZAP70、LAT、PLCy等合成最终RAS通路受到抑制,免疫通路受到破坏。通过大口黑鲈转录组数据中获得了IL-8和Semaphorin-4A基因的部分序列对其进行克隆获得IL-8和Semaphorin-4A基因的全长。IL-8又称CXC L-8,是CXC趋化因子亚家族中的一员在炎症和免疫反应中起着至关重要的作用,并在对各种疾病的反应中被激活。克隆得到的IL-8基因全长序列为879 bp、编码氨基酸为526个、分子质量为58.04 KDa等电点为6.83。信号素蛋白是一组蛋白质,Sema4A是第四类信号量家族成员在免疫系统、神经系统和代谢系统中有多种作用。有助于形成细胞,体液和先天的免疫反应促进T细胞活化和炎症反应。克隆得到的Semaphorin-4A基因全长是2,267bp编码氨基酸为99个、分子质量为10.99 KDa等电点为9.24。以大口黑鲈为实验对象根据其氨氮半致死浓度设计2个氨氮胁迫组分别为对照组（0 mg/L）和氨氮胁迫组（30 mg/L）分别在胁迫0、6、12、24、48、72、96 h取其头、肾、脑、肝、鳃、脾组织,采用q RT-PCR方法分析急性氨氮胁迫对大口黑鲈IL-8和Semaphorin-4A基因在不同组织中的表达影响。结果表明IL-8和Semaphorin-4A基因在所有组织中均有表达,氨氮胁迫后IL-8和Semaphorin-4A基因在肠、肾、脑、肝、鳃、脾中的表达量均有明显变化。为今后研究氨氮胁迫对大口黑鲈影响的机理研究提供理论资料。