新疆牛源奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药与毒力基因检测分析

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近年来奇异变形杆菌引起人畜疾病问题逐渐严重,对牛养殖业造成的经济损失逐渐增加,因此为了解新疆地区集约化牛场内犊牛奇异变形杆菌的感染率及耐药与毒力的情况,本实验从新疆南北疆部分牛场采集了638份牛肛拭子,利用液体培养基前增菌、选择性培养基分离纯化、形态学鉴定、生化鉴定、分子生物学鉴定的方法确定奇异变形杆菌的感染率。采用药敏试验,PCR方法扩增耐药基因,PCR方法检测I、II、III类整合子和耐药基因盒的阳性携带率的方法研究这些菌株的耐药情况,采用PCR方法扩增毒力基因研究菌株的致病性。(1)从新疆部分牛场采集的638份牛肛拭子中分离得到51株奇异变形杆菌菌株。(2)51株奇异变形杆菌普遍具有多重耐药性,对青霉素、多西环素、麦迪霉素、多甲基黏菌素、替硝唑考拉宁、克林霉素的菌株耐药率均达到100%,对头孢他啶、庆大霉素、丁胺卡那耐药率仅为10%-20%。(3)51株奇异变形杆菌菌株菌株耐药基因CTX-M的携带率为45.1%,TEM的携带率为13.7%,SHV的携带率为21.6%,qnr A的携带率为9.8%,qnr B的携带率为0%,qnr S的携带率为27.4%,aac Ib的携带率为39.2%,(4)51株奇异变形杆菌菌株Ⅰ类整合子的阳性携带率为72.55%,Ⅱ类整合子的阳性携带率为50.98%,Ⅰ、Ⅱ类整合子同时存在的菌株有26株,阳性率为50.99%,Ⅰ类整合子中携带耐药基因盒的菌株有25株,Ⅱ类整合子中携带耐药基因盒的菌株有8株,携带的耐药基因和药敏实验结果中的耐药表型基本一致。(5)51株奇异变形杆菌菌株毒力基因urec的阳性携带率为45.09%,mrp的阳性携带率为2.0%,pmf A的阳性携带率为31.4%,atf A的阳性携带率为31.4%,atf C的阳性携带率为72.5%,zap A的阳性携带率为92.2%,未检出毒力基因uca A与rsb A。综上所述,分离到的菌株耐药表型发生了明显的变化,当牛场发生奇异变形杆菌感染时,可以选择头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类等多种药物进行治疗,整合子携带耐药基因与耐药表型相近,可作为检测奇异变形杆菌耐药性的新方法。致病性与毒力因子密切相关。
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