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一氧化氮(NO)对血管内皮细胞功能有着重要的影响作用,抗氧化剂则可以通过清除活性氧(ROS)来发挥其药理作用。为深入研究抗氧化剂对内皮细胞NO和ROS的调节作用,本文以传统中药丹参的主要活性成分丹酚酸B为例,以体外培养的人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)为模型,考察了丹参酸B对血管内皮细胞一氧化氮合成的影响效应,并对血管内皮细胞内活性氧与一氧化氮之间的相互作用关系以及丹酚酸B的调控作用的进行了初步研究,最后结合丹酚酸B的分子结构分析了其抗氧化活性。采用Griess试剂法检测丹酚酸B作用下内皮细胞胞外NO含量的变化,结果表明丹酚酸B预处理12h能明显促进NO的合成;DAF-FM DA荧光试剂法检测胞内NO的含量,结果显示丹酚酸B处理2h内对NO的合成没有明显影响,12h后才显出效应;Western blotting检测到丹酚酸B能提高内皮细胞eNOS的表达,并保持在一个较稳定的水平上,同时活化iNOS的表达。以过氧化氢(H2O2)作为外源性活性氧处理内皮细胞,检测表明它能显著提高了细胞内ROS水平,同时促进eNOS和iNOS的表达,导致内皮细胞过量地合成NO。丹酚酸B预处理能抑制由H2O2引起的细胞内ROS水平的提高,还可以减少由H2O2引起的NO过量释放。在脂多糖(LPS)刺激下丹酚酸B同样能促进NO的释放。根据ABTS和DPPH自由基清除实验计算丹酚酸B的Vc抗氧化当量(VCEAC),结果表明丹酚酸B的VCEAC为Vc的1.87倍,从结构分析进一步证明了丹酚酸B具有很好抗氧化活性。结合丹酚酸B的抗氧化活性研究发现丹酚酸B可以促进内皮细胞NO的合成,清除细胞内ROS,调节了NO和ROS的作用关系,为阐述丹酚酸B的药理作用及丹参的二次开发奠定了基础。