量子点—适配体荧光传感器快速检测卡那霉素和妥布酶残留

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在畜牧业和水产业中,不合理使用卡那霉素和妥布霉素导致它们残留在动物源性食品中,被人体食用后对健康造成影响。因此,开发一种适用于现场检测的简便快速方法,实现对卡那霉素和妥布霉素残留的特异性检测,是强化市场监管所迫切需要的。适配体是一种对特定靶标具有高亲和力的单链短DNA或RNA;量子点是一种可以实现一元激发、多元发射的半导体荧光纳米晶;将两者偶联为可特定靶标进行选择性荧光标记的生物传感器,将有助于实现对卡那霉素和妥布霉素残留进行同时快速荧光检测。本文对此开展了研究,具体研究结果如下:(1)建立了采用巯基乙酸作稳定剂合成了水溶性CdTe量子点的方法。优化的合成条件是:反应时间2 h,反应温度95℃,pH值为10,巯基乙酸用量200μL。在优化条件下制备的量子点为球形,粒径约3.4 nm,分散性和结晶性好。通过水热法制备了羧基化Fe3O4纳米磁珠。磁珠为球形,粒径约340 nm,分散性良好。(2)建立了制备量子点-适配体和适配体互补序列-磁珠复合物的方法。优化的反应条件是:量子点与适配体摩尔比为1:6.8,磁珠与互补序列偶联反应温度25℃,反应时间3 h,磁珠可偶联互补序列0.237μmol/g。利用建立的方法成功制备了量子点-适配体和适配体互补序列-磁珠复合物。利用碱基互补配对作用成功将量子点-适配体复合物和适配体互补序列-纳米磁珠复合物组装成为量子点-适配体-适配体互补序列-纳米磁珠荧光传感器,该传感器信号能够随卡那霉素浓度的变化而改变。(3)建立了一种基于量子点-适配体荧光传感器同时检测卡那霉素和妥布霉素残留的新方法,优化检测系统的参数为:卡那霉素和妥布霉素的量子点-适配体-适配体互补序列-纳米磁珠复合物浓度为0.4和0.5 g/L,孵育温度为37℃,孵育时间30 min。在最佳条件下,卡那霉素和妥布霉素随传感器荧光强度的线性响应范围均为1-20μg/L,检出限分别为0.11和0.21μg/L。该方法可应用于牛奶中卡那霉素和妥布霉素残留的检测,卡那霉素的加标回收率在95.3%-101.3%之间,妥布霉素的加标回收率在93.3%-97%之间。
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