论文部分内容阅读
前言阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)主要表现为进行性记忆和语言能力丧失及识别能力障碍,病理解剖发现有脑萎缩、神经元纤维改变和老年斑。此后有大量研究显示神经炎斑中有Aβ(含β折叠结构的淀粉样蛋白)聚集是AD的重要病理特征。在众多的与AD的产生和发展有关的因素中雌激素是很重要的一项。基础研究发现雌激素可以增加大脑皮层血液供应,降低β—淀粉样物质的沉积,增加基底前脑胆碱乙酰基转移酶的水平。我们利用给去卵巢(OVX)大鼠海马内注射Aβ来观察海马内神经元的变化。在这里作者将Aβ1-42注入去卵巢(OVX)大鼠和未去卵巢大鼠海马后连续2次测定OVX和非OVX大鼠海马中Aβ1-42阳性神经元的数量,观察雌激素对Aβ是否有清除作用从而进一步说明雌激素在AD中的作用。资料与方法250-275G健康雌性SD大鼠40只,分为4组:A组OVX大鼠10只,海马区注射Aβ1-425ul;B组OVX大鼠10只,海马区注射等容积生理盐水;C组非OVX大鼠10只,海马区注射Aβ1-425ul;D组对照组10只,非OVX大鼠海马区注射等容积生理盐水。1、标本用放免法测定血清雌激素各组试验动物在去卵巢45天时、60天时分别取材,第一批各组取5只,第二批各组取5只。用3%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉,经升主动脉插管,取心脏血2ml分离血清置冰箱保存待测(标本用放免法测定血清雌激素)。2、免疫组织化学定量分析取脑置于4%多聚甲醛固定液中固定,30%蔗糖浸泡至下沉,在注射点附近连续冠状冰冻切片,抗Aβ免疫组织化学染色,切片置于40倍光镜下观察,细胞无色或淡黄色为阴性,红棕色为阳性。参照Paxinos鼠脑图谱,观察海马区内Aβ阳性神经元的数量并照相,然后进行光密度测定。所有数据采用SPSS11.0统计软件进行分析,数据以均值±标准差表示,统计分析用t检验。实验结果1、雌激素水平A组、B组OVX大鼠血清E2水平显著低于C组、D组非OVX组(P<0.05)。2、免疫组织化学结果A组45天、60天无明显差异(P>0.05),B组45天、60天无明显差异(P>0.05),C组45天、60天有显著差异(P<0.05),D组45天、60天无明显差异(P>0.05);A组45天与B、C、D组有显著差异(P<0.05),A组60天与B、C、D组有显著差异(P<0.05);B组45天与C组无明显差异(P>0.05)、与D组有明显差异(P<0.05),B组60天与C组有明显差异(P<0.05),与D组有明显差异(P<0.05);C组45天与D组有明显差异(P<0.05),C组60天与D组无明显差异(P>0.05)。结论雌激素水平下降可以使Aβ在海马区沉积增加,雌激素对大鼠海马区过量的Aβ有清除作用,这为临床上应用雌激素预防和治疗阿尔茨海默病提供了依据。