维生素D缺乏对急性酒精诱导小鼠肝脏脂质沉积的影响

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目的探讨维生素D缺乏对急性酒精诱导的小鼠肝脏脂质沉积的影响。方法将5周龄ICR雄鼠随机分成标准饲料喂养组和维生素D缺乏饲料喂养组,每组20只。在小鼠喂养了12周后,对两组小鼠再次分组,将正常饲料喂养小鼠随机分成对照组(Control)和酒精组(ETOH),每组10只;将维生素D缺乏饲料喂养小鼠随机分成维生素D缺乏组(VDD)和维生素D缺乏+酒精组(VDD+ETOH),每组10只。所有小鼠禁食2 h,ETOH和VDD+ETOH组小鼠以4 g/kg小鼠体重为标准,一次灌50%(V/V)乙醇溶液,Control和VDD组小鼠同时一次灌胃给予等体积的生理盐水。于给药12 h后,对小鼠进行剖杀,收集血清用于血液生化指标检测,包括25(OH)D、TG、TCH水平和ALT活力;取肝脏后称重,用H&E和油红O染色评估肝脏脂质沉积情况,其余的肝脏迅速放于液氮保存,用于检测肝脏TCH和TG含量以及用于提取总RNA和核蛋白,用RT-PCR检测肝脏脂质代谢相关基因表达,用Western blotting检测肝脏脂质代谢相关蛋白的表达。结果标准饲料喂养组和维生素D缺乏饲料喂养组小鼠体重均呈增长趋势,且两组小鼠体重之间无显著性差异。VDD组和VDD+ETOH组小鼠血清25(OH)D水平分别为(3.30±0.21ng/ml)和(3.63±0.33ng/ml),显著低于Control组(15.80±1.40ng/ml)和ETOH组(14.67±1.41ng/ml)。与对照组相比,单次乙醇暴露小鼠肝重、肝脏系数以及血清和肝脏TG含量均明显增加;HE染色和油红O染色显示,单纯酒精暴露组肝脏发生明显脂质沉积;维生素D缺乏显著降低了酒精引起的血清谷丙转氨酶(ALT)水平的上升,且减轻酒精诱发的肝脏TG含量和脂质沉积。维生素D缺乏显著下调了急性酒精诱导的肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)下游靶基因fas和acc的m RNA表达,同时抑制了急性酒精诱导的肝脏SREBP-1c的激活;此外,维生素D缺乏减轻了酒精诱导的肝脏CPT1α、CYP4A10和CYP4A14基因表达的下调,同时抑制了酒精引起的肝脏过氧化物增殖物激活受体α(PPARα)蛋白水平的下调;维生素D缺乏对于酒精处理小鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因及其下游靶基因的表达均无显著影响。结论维生素D缺乏并未能直接引起小鼠的肝脏脂质沉积,相反,维生素D缺乏可以通过减少脂肪酸从头合成和促进脂肪酸β氧化及ω氧化途径来减轻酒精诱导的肝脏脂质沉积。
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