E-cadherin和Snail蛋白在结直肠癌中的表达特点及其临床意义

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背景与目的:结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,在消化道肿瘤中发病率仅次于胃癌和食管癌。近年来,随着人民经济水平提升、饮食结构改变巨大,导致结直肠癌的发病率上升明显。结直肠癌发过程病复杂,参与因素众多,早期发现不易,患者就诊时常常发生局部侵袭浸润或远隔器官及淋巴转移,预后不佳。因此,深入了解结直肠癌发病、侵袭转移的机制,对于寻找预测结直肠癌的分子标志物、提高早期诊断率、辅助治疗方案优化、以及改善患者预后等,都具有重要的意义。E-cadherin是一类钙粘附素(Cadherin),主要存在于人体的非神经上皮细胞中,作用是维持细胞间正常连接和上皮细胞极性,同时参与细胞内信号传导,其与多种恶性肿瘤的生物学行为密切相关。Snail是一类具有锌指结构的转录因子,在脊椎动物的中胚层起进化保守的作用。Snail家族包括Sail、E12/FA7、ZEBl、SIPl、Slug。Snail的作用是促进细胞间的迁移转换,包括EMT,Snail与共抑制子形成转录抑制复合物,并相互作用,抑制基因表达。Snail与E-Cadherin在肿瘤的发生、发展、浸润等过程中存在相关性,一般认为,E-Cadherin是Snail的靶基因,Snail与E-Cadherin结构内的E-box序列相结合(通过锌指结构),直接抑制E-Cadherin的转录,从而降低上皮细胞间的粘附作用,使细胞间结构松散,易于扩散,发生远处转移和浸润。Snail表达的升高会引起E-Cadherin表达抑制。Snail蛋白的高表达和E-Cadherin的抑制在食管癌、胃癌、肝癌、宫颈癌等的转移以及与组织学分级密切相关。故Snail、E-Cadherin在肿瘤的衍化过程中是关键的环节。本课题以术后切除癌旁相对正常结直肠上皮、癌前病变组织、结直肠癌石蜡标本为研究对象,制作石蜡组织微阵列并运用免疫组织化学ABC染色方法,检测E-cadherin与Snail在上述组织中的表达情况和分布特点,并分析该基因的表达与结直肠癌各病理特征之间的关系,为结直肠癌的早期诊断、预后评价和基因治疗提供有意义的基础理论依据。材料与方法:结直肠癌和癌旁组织均来自大连大学附属新华医院2008-2010年未经化放疗的诊断明确的结直肠癌手术切除标本62例及相应癌旁组织20例。采用石蜡组织微阵列技术,运用免疫组织化学(IHC)方法,对E-cadherin与Snail在结直肠癌旁组织与癌中的表达情况和分布特点进行检测,分析该基因的表达与肿瘤各病理特征间的关系。采用SPSS11.5软件包,应用Kruskal-Wallis与MammWhitney方法进行统计学差异分析。结果:1.E-cadherin与snail在癌旁与肿瘤组织中的表达特点在21例癌旁相对正常组织中和62例结直肠癌组织中,E-cadherin下调率分别为28.6%(6/21)和83.9%(52/62)。统计学分析显示,二者有显著性差异(p=0.000)。62例肿瘤中16例结肠肿瘤和46例直肠标本中E-cadherin下调率分别为87.5%(14/16)和82.6%(38/46),两者无统计学差异(p=0.649)。Snail在上述组织阳性率分别为52.4%(11/21)和82.9%(51/62),有显著性差异(p=0.007)。结、直肠标本中阳性率分别为93.8%(15/16)和78.3%(36/46),两者无统计学差异(p=0.166)。2. E-cadherin的表达与肿瘤各病理指标之间关系E-cadherin在大体分型为溃疡型的结直肠癌中下调率91.1%,隆起型为64.8%,p=0.012,存在统计学差异。在不同分化程度样本中下调率分别为71.4%、90%和85.7%,无统计学差异p=0.387。E-cadherin表达在不同性别、年龄、病变大小和浸润深度和有无淋巴结转移组间无差异(p>0.05)。Snail表达的阳性率在不同性别、年龄、大体分型、分化程度、病变大小、浸润深度和有无淋巴结转移组间无差异(p>0.05)。3.E-cadherin与Snail表达相关性分析显示,仅4例患者呈现E-cadherin表达不变及Snail表达阴性,6例为E-cadherin表达不变及Snail表达阳性,7例为E-cadherin表达下调及Snail表达阴性,绝大多数罹癌患者,45例呈现E-cadherin表达下调及Snail表达阳性。相关性分析显示二者负相关,且具有统计学意义(p=0.045,r=-0.256)结论:1. E-cadherin蛋白表达在结直肠癌中显著下调,Snail阳性表达显著升高,二者在肿瘤发展过程中是重要的分子事件,具有一定诊断学价值。2. E-cadherin与Snail表达在本研究中与不同性别、年龄、大体分型和病变大小及侵袭转移指标组间无明显差异。但二者呈现负相关性,证明E-cadherin蛋白表达可能受Snail调控。二指标相结合可以作为诊断以及判断结直肠癌恶性程度的潜在分子指标,具有一定的肿瘤诊断学意义。
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