研究背景及目的：　　肺炎支原体（MP）引起的肺炎支原体肺炎（MPP）好发于学龄前及学龄儿童，占儿童社区获得性肺炎的10-40％。MPP在临床表现、影像学上无特异性，对β-内酰胺类抗生素天然耐药而首选大环内酯类治疗。近年我国大环内酯类耐药肺炎支原体（MRMP）逐渐增多，MRMP感染可能导致患儿病情加重及治疗困难,而大环内酯类药物过度使用又会导致耐药发生。故早期、准确的实验室检测方法对临床诊断MP感染和指导治疗至关重要。本研究采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）及RNA实时荧光恒温扩增（SAT）技术检测MP，以了解FQ-PCR及SAT技术的早期诊断价值；评价MPP患儿急性期痰液MP-DNA载量与临床特征的相关性；并主要探讨MPP患儿经大环内酯类治疗1个疗程后痰液MP-RNA结果与MP载量、MP耐药、临床疗效等的关系，评价大环内酯类药物的治疗效果，为判断支原体肺炎疾病的病情，转归及预后提供新思路。另外，免疫炎症因子的水平可能可以预测疾病的严重程度。　　方法：　　选取2015年6月-2016年11月期间于我院住院并确诊为MPP的60例患儿，在入院当天（急性期）和经大环内酯类治疗1疗程结束后当天（治疗后)同时采用FQ-PCR检测痰液MP-DNA、SAT检测痰液MP-RNA，ELISA检测血清MP-IgM抗体，比较三种检测方法的阳性率；选取其中血清MP-IgM为阳性，急性期MP-RNA及MP-DNA均阳性，且院前未经大环内酯类治疗的50例MPP患儿为主要研究对象，巢式PCR联合DNA测序技术检测MP23SrRNA基因突变，分析大环内酯类耐药率及基因突变特点，同时采用ELISA方法检测患儿血清的IL-10、IFN-γ、TNF-α水平，并收集进行临床分析。50例患儿根据不同标准分组：①根据急性期痰液MP-DNA载量（以106copies/ml为界限）分为低菌量组18例（MP-DNA≤106copies/ml）与高菌量组32例（MP-DNA＞106copies/ml）；比较两组MPP患儿在临床症状、肺外并发症、实验室检查、影像学、治疗上的差别。②根据经大环内酯类药物治疗1疗程后痰液MP-RNA检测结果：分为MP-RNA阳性组28例和MP-RNA转阴组22例；比较两组MPP患儿在MP-DNA载量， MP耐药，临床疗效，实验室检查，影像学，治疗上的差别。　　结果：　　1、60例MPP患儿中，急性期检测MP阳性率血清学为55%，FQ-PCR为90.0%， SAT技术为88.3%，急性期FQ-PCR、SAT技术检测MP阳性率明显高于血清学，差异有统计学意义（P＜0.05），FQ-PCR与SAT之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后复测MP阳性率血清学86.7%，FQ-PCR为76.7%， SAT为50.0%，FQ-PCR、血清学检测MP阳性率明显高于SAT，差异有统计学意义（P＜0.05），FQ-PCR与血清学之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。　　2、与急性期低菌量组MPP患儿相比，急性期高菌量组MPP患儿总热程、使用大环内酯类后热程、住院时间更长，总热程≥7d及高热患儿的比例更高，差异均有统计学意义(P＜0.05)。实验室检查上，高菌量组外周血淋巴细胞百分数及绝对值低于低菌量组，而中性粒细胞百分比、IL-10水平高于低菌量组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。　　3、比较治疗后MP-RNA阳性组与MP-RNA转阴组，①两组患儿急性期痰液MP-DNA拷贝数相关性差异无统计学意义(P＞0.05)；MP-RNA阳性组中治疗前后痰液MP-DNA拷贝数下降程度＜10倍的比例较MP-RNA转阴组更高，而治疗前后MP-DNA拷贝数下降程度≥1000倍的比例较MP-RNA转阴组明显更低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。②MP-RNA阳性组患儿含耐药基因率高于MP-RNA转阴组，差异有统计学意义（P＜0.05）。③与治疗后MP-RNA转阴组MPP患儿相比，MP-RNA阳性组MPP患儿的住院时间、总发热时间、退热时间、咳嗽缓解时间更长，血清IFN-γ水平更高，联合激素及其他抗菌药物治疗的比例更高，差异均有统计学意义（P＜0.05）；在其他实验室检查、影像学及大环内酯类治疗上差异无统计学意义(P＞0.05)。　　结论：　　1、FQ-PCR及RNA实时荧光恒温扩增（SAT）技术检测儿童MP感染早期阳性率明显高于血清学。　　2、儿童MPP急性期痰液MP-DNA载量与临床特征有相关性，高菌量组患儿病情相对更为严重。　　3、SAT技术检测MPP患儿痰MP-RNA可反映疾病病情及大环内酯类治疗疗效。当经大环内酯类药物治疗1疗程后MP-RNA仍为阳性时，表明大环内酯类治疗效果欠佳，且患儿病情较重，血清IFN-γ水平更高，耐药率较高，需改用激素及其他抗菌药物治疗的比例较高。