油菜蜂花粉抗前列腺炎及增生活性成分的研究

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油菜蜂花粉(Rape bee pollen)是由蜜蜂采集油菜花的花粉过程中加入花蜜和自身分泌物加工而成的,带有蜜蜂后肢夹痕的不规范团状物,内含丰富的生物活性物质,有抗前列腺疾病、抗肿瘤、清除自由基等活性。但目前油菜蜂花粉为原料的药物制剂起效缓慢,药量大,机制及活性物质基础研究不完善,因此本文为探索油菜蜂花粉抗前列腺疾病活性成分的物质基础,做了以下研究:(1)油菜蜂花粉不同提取物抗慢性非细菌性前列腺炎(CNP)的活性研究。用高浓度乙醇提取粉粹后的油菜蜂花粉得到醇提物,滤渣用去离子水再次提取得水提物。再用石油醚、乙酸乙酯对醇提物进行萃取,共得到油菜蜂花粉水提物、醇提物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物四个部分。建立角叉菜胶致大鼠前列腺炎模型研究探讨油菜蜂花粉各提取物抗CNP活性。结果表明醇提物和乙酸乙酯提取物均能显著降低CNP大鼠前列腺湿重、前列腺指数及血清和匀浆中的IL-8(白介素8)含量,而水提物、石油醚萃取物的抗CNP活性均不显著。且前列腺大体形态及组织病理学变化与实验室检测结果相符。(2)油菜蜂花粉各粗分组分抗CNP活性研究。将有抗CNP活性的醇提物和乙酸乙酯提取物合并,利用MCI色谱柱对合并组分进行粗分离,得到粗分组分CI、CII、CIII、CIV。分别作用于CNP模型大鼠,结果显示粗分组分CII、CIII可显著降低CNP模型大鼠前列腺湿重、前列腺指数、血清和组织匀浆中的IL-8含量,粗分组分CIV的抗CNP活性不显著,但具有利尿作用。前列腺大体形态及组织病理学变化与实验室检测结果相符。(3)组分CII、CIII、CIV混合物作用于雄激素诱导的BPH模型大鼠,结果显示混合物制剂可减小前列腺湿重和前列腺指数,降低BPH大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)、睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度。有效抑制前列腺增生。另外,根据IL-8浓度变化推测炎症可能伴随良性前列腺增生发生发展。并且混合物制剂可降低BPH模型大鼠IL-8的浓度(P<0.01)。(4)油菜蜂花粉活性组分的分离鉴定。利用MCI、ODS等色谱柱对组分组分CII、CIII、CIV进行分离,经纯化后得化合物1、2、3。利用核磁共振波谱技术鉴定化合物1、2、3的物质结构:化合物1为十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酰基-N-乙基甘油醚;化合物2为1’-十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯基-2’-甲氧基-3’-十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酰基-N-乙基-甘油醚;化合物3为HO-C6H4-CH=CH-CO-NH-(CH2)5-NH2。
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