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背景：股骨头缺血性坏死(ONFH)是骨科常见的一种疾症,发病率高,致残率高,坏死后引起骨结构的破坏,继而导致骨结构塌陷和关节功能丢失,产生关节疼痛。而股骨头关节软骨病变被认为是骨结构塌陷破坏的结果,针对软骨病变修复方法意见不一致。据目前文献报道各种修复方法也不尽如人意。我们所采用Bio-gide胶原膜负载骨髓间充质干细胞修复软骨缺损的试验研究为这一难题的解决提供理论支持。目的：本实验拟研究犬骨髓基质干细胞分离、培养与鉴定的方法,探讨其作为股骨头坏死软骨缺损修复组织工程种子细胞的可行性,并将骨髓基质干细胞与Bio-gide胶原膜复合培养,探讨Bio-gide胶原膜做为骨髓基质干细胞生长载体的优势。方法：体外分离培养BMSCs,进行倒置显微镜/透射电镜下形态学观察,细胞H-E染色,免疫荧光等检查,细胞表面抗原检测：并在体外由骨髓基质干细胞向软骨细胞诱导分化培养及进行甲苯胺蓝,Ⅱ型胶原的免疫组织化学染色等生物学鉴定：将BMSCs与Bio-gide胶原膜进行体外复合培养,通过倒置相差显微镜,透射电镜等进行观察。结果：全骨髓血离心法结合贴壁筛选法能获得高纯度高活性的BMSCs,在MTT法检测时发现第3代细胞增殖速度较第1、2、4、5代稍快,对数期持续时间也相对较长,免疫荧光检测发现高表达CD44, CD90阳性,CD34阴性,说明所获得细胞不是成纤维细胞,造血细胞及内皮细胞；骨髓基质干细胞在一定的条件下可以向软骨细胞转化,进行甲苯胺蓝染色发现见各代软骨细胞均着色,传代后染色逐渐变浅。Ⅱ型胶原免疫组化染色见5代以内软骨细胞内棕黄色颗粒沉淀。BMSCs可在Bio-gide胶原膜上贴附增殖,并复层生长,BMSCs并可与Bio-gide胶原膜长为一体。结论：BMSCs取材方便、创伤小；扩增分化能力强,在体外一定的条件下具有向软骨细胞转化的潜能。BMSCs可作为股骨头坏死软骨缺损修复组织工程种子细胞来源。Bio-gide胶原膜可作为骨髓基质干细胞生长载体。