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水果采后真菌性病害会造成巨大的经济损失。以往防治水果采后病害最常用的方法是使用化学杀菌剂,而化学杀菌剂的长期大量使用不仅导致水果致病菌产生了抗药性,还严重污染环境并危害人类健康。因此,寻找安全、无污染又不对人类健康造成伤害的防治方法迫在眉睫。目前,采用生物防治的方法,以有效微生物取代化学杀菌剂用于水果采后病害的防治已显示出巨大的应用前景,尤其是使用具有拮抗活性的酵母菌防治水果采后病害已成为研究热点,拮抗酵母菌已被实验证明能有效控制多种水果采后病害的发生,但其防治效力和化学杀菌剂相比,仍有较大的差距。因此,如何提高拮抗酵母菌的拮抗效力是目前世界各国学者关注的课题。
本论文采用本实验室已经筛选分离并鉴定的卡利比克毕赤酵母(Pichiacaribbica)为研究对象,利用海藻糖诱导培养P.caribbica提高其对各种水果采后病害的生防效力,研究其生理及分子机制,具体分为以下三个方面:(1)海藻糖诱导培养P.caribbica对草莓、桃果和苹果常见真菌病害的控制效力,并对果实的自然腐烂及贮藏品质的影响作出评估;(2)海藻糖诱导培养P.caribbica增强其拮抗活性的生理机制;(3)海藻糖对P.caribbica细胞蛋白表达的影响;(4)海藻糖诱导培养P.caribbica对苹果蛋白表达的影响。
本论文主要试验结果如下:
1.当使用0.5%的海藻糖和0.5%的葡萄糖做为碳源诱导培养P.caribbica时,能显著提高P.caribbica对草莓、桃果和苹果葡枝根霉、灰葡萄孢及扩展青霉的拮抗效力。同时,试验结果还表明,海藻糖诱导培养P.caribbica对果实在自然状况下病害的发生有显著的抑制作用,并且对果实贮藏品质没有产生不利影响。
2.海藻糖诱导培养P.caribbica抑制草莓和苹果病害的效力得到增强,其可能的生理机制包括:海藻糖诱导培养P.caribbica提高其胞内海藻糖含量积累;增强重寄生作用;对果实多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)等抗性酶的诱导加强,抑制丙二醛(MDA)在果实细胞内的积累,从而延缓了果实衰老,增强了水果对病原菌的抗性。
3.通过蛋白质组学技术,对添加海藻糖诱导培养P.caribbica与未添加海藻糖诱导培养P.caribbica细胞蛋白进行了分离和比较研究,结果显示,经海藻糖诱导培养的P.caribbica,酵母细胞中少数与抗性相关的蛋白及多种基础代谢蛋白被诱导或抑制。
4.通过蛋白质组学技术,对添加海藻糖诱导培养P.caribbica与未添加海藻糖诱导培养的P.caribbica及对照处理苹果果实蛋白进行了分离和比较研究,结果显示,经添加海藻糖诱导培养的P.caribbica处理,苹果中少数与抗性相关的蛋白及多种基础代谢蛋白被诱导或抑制。