基于ATP生物发光的菌落总量快速检测系统研究

来源 :山东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyanhao1986
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在当今的中国温饱问题已经被解决,日常生活中人们已经不再仅仅关注如何吃饱,而是更加关注如何吃好,所以食品安全卫生问题为人们越来越关注,但是不断爆出的食品卫生事件使人们的神经紧绷。在食品安全检测中,细菌数目是判断食品卫生和新鲜程度的一个重要指标。检测食品生产场所的细菌数目也可以反映食品生产环境卫生是否达标,细菌数目的检测对于食品安全变得越来越重要。现有的细菌检测方法有光学显微镜直接计数法、荧光显微镜计数法,以及平板计数法等[1]。但是这些细菌检测方法,由于受实验器材,检测方法复杂程度,以及检测设备人员素质等各方面的影响,无法对待测样品进行现场实时检测。例如光学显微镜直接计数法,需要检测人员,在现场提取检测样品,带回实验室,制作成适合在显微镜下进行观察的载玻片,用肉眼通过光学显微镜观测细菌,并记录细菌的数目。这就对检测人员提出了很高的专业要求,需要检测人员具有相关的生物技术背景才能完成相应的检测,而且检测结果容易受到人为因素的干扰。同时所检测样品,必须带回实验室才能够进行检测。需要较长的时间才能得到样品中细菌数目,这显然极大的制约了该检测法的适用场合和适用范围,无法满足我们对现场快速检测的要求。荧光显微镜计数法以及平板计数法都存在各种各样的技术问题,无法满足人们现场快速检测细菌数目的要求。为了满足现场快速检测细菌的目的,基于ATP生物发光以最新的光电转换和电子技术为基础提出了基于ATP生物发光的菌落总量检测方法。ATP的专业名称为三磷腺苷。该检测方法是以细菌细胞和各类微生物细胞中的供能物质ATP为基础,生物的细胞中都存在ATP,而且每个细胞中ATP的含量是大致相同的。ATP的数目与细菌细胞数目成线性比例关系,可以通过检测细菌中ATP总体含量间接反映细菌的总体含量。但是ATP存在于细菌细胞中无法直接进行检测,需要把ATP游离于细胞体才能进行检测。ATP在氧离子、镁离子和荧光素酶的催化下与荧光素反应可以发出荧光。而荧光发光强度与ATP的数量也成线性比例关系,即荧光发光强度可以反映ATP的数目。可以采用光电转换技术将荧光转化为电信号,通过A/D转换将光信号转化为数字电压信号送由单片机(MCU)或计算机进行自动化处理,进行数据分析。基于ATP的生物发光细菌检测系统,具有传统检测无法比拟的优点。首先检测时间短,只需短短几分钟就可以完成细菌数目检测[2]。系统体积小便于携带,能够适应现场检测的需求。再次本系统操作方便,对检测人员无需专业培训,便可完成整个检测流程。本系统在准确性和相关性上可以达到传统方法的90%以上,可以和传统方法联合使用进一步提高检测结果的可靠性[3-5]。对当今食品卫生,以及医疗卫生等有重要的指导意义。ATP生物发光细菌检测系统应用范围广泛,不仅可以应用到食品卫生现场检测方面。该系统还可以应用到医疗卫生领域指导医院消毒卫生情况,如果与其他医疗手段相结合可以监测癌细胞的药敏性等等。同时也可以应用到生命科学、生态科学、自然环境监测、水质监测等领域。ATP生物发光监测系统与其他学科结合使用可以极大的扩宽其适用范围。对科学研究有重要的参考与指导意义,其进一步应用价值需要与科学实验结合在实践中探究新的应用价值。
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