【摘 要】
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通过14天的种子培养,发酵培养第90小时时达到生物量和多糖含量最大值,分别为7.9 g/L和1.3 g/L。通过Sephadex G50柱层析图谱和聚丙烯酰胺电泳,证明S-GFB为均一组分。Sephadex
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通过14天的种子培养,发酵培养第90小时时达到生物量和多糖含量最大值,分别为7.9 g/L和1.3 g/L。通过Sephadex G50柱层析图谱和聚丙烯酰胺电泳,证明S-GFB为均一组分。Sephadex G200柱层析证明水溶性多糖(GFA)为均一组分。通过对GFA,S-GFB紫外光谱分析结果表明,GFA不含有蛋白质,而S-GFB含有少量的蛋白。S-GFB中含硫量17.7%。通过S-GFB的红外光谱分析,其中两个特征吸收峰(1236 cm-1和823 cm-1)出现表明硫酸酯化反应已经完成。S-GFB和GFB的微观形态通过原子力显微镜观察。S-GFB(1μg/mL)展现出颗粒状,不同于GFB(1μg/mL)的长多糖链。S-GFB的抗凝血活性通过测定活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT),凝血酶原时间(PT),对APTT和TT有显著的的延长,但是对PT没有影响。在溶栓实验中,表明S-GFB对溶栓有重要的作用。小鼠药理实验表明,S-GFB明显反映出对小鼠血脂的调节作用。在实验条件下给药剂量为50 mg/kg·d左右时,高血脂症模型小鼠可达到治愈的程度。S-GFB呈现出明显的降血脂作用。本文研究的目的主要是检测一种硫酸酯化多糖(S-GFB)的抗凝血,降血脂活性,它由灰树花菌丝体的水不溶性多糖制备而成。本论文潜在的实际应用价值体现在以下两点:首先,灰树花菌丝体发酵培养不到四天即达到了生物量最大值。这种缩短发酵周期的方法可以被应用到灰树花菌丝体的工业生产上。其次,水不溶性多糖占据灰树花菌丝体多糖相当大的比例。为了能够充分利用水不溶性多糖,我们利用氯磺酸吡啶法把它改造成有较强生物活性的水溶性多糖。
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