【摘 要】
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肿瘤是危害人体健康的一种重要疾病,传统的治疗手段(放疗、手术、化疗)创伤大、并发症多,同时药物对正常细胞的无差别攻击,会造成巨大的副作用,给患者带来极大的痛苦。基于肿瘤微环境(TEM)的纳米药物具有高的肿瘤组织穿透性和滞留效应,大大提高其被肿瘤细胞特异性摄取,从而增加肿瘤治疗的有效性和安全性。新型抗肿瘤纳米药物治疗方法有化学动力学疗法、光热疗法、声动力疗法等,但是受到肿瘤部位富集较少、分布不均和单
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肿瘤是危害人体健康的一种重要疾病,传统的治疗手段(放疗、手术、化疗)创伤大、并发症多,同时药物对正常细胞的无差别攻击,会造成巨大的副作用,给患者带来极大的痛苦。基于肿瘤微环境(TEM)的纳米药物具有高的肿瘤组织穿透性和滞留效应,大大提高其被肿瘤细胞特异性摄取,从而增加肿瘤治疗的有效性和安全性。新型抗肿瘤纳米药物治疗方法有化学动力学疗法、光热疗法、声动力疗法等,但是受到肿瘤部位富集较少、分布不均和单一疗法疗效差等问题限制。为了实现肿瘤安全高效的精准治疗,本论文提出了一种转铁蛋白靶向修饰的铁酸钴纳米粒子,实现了光热和化学动力学协同的精准抗肿瘤治疗。第一部分,转铁蛋白修饰的铁酸纳米粒子(Co Fe2O4@Tf,CFOT)的构建及性质和性能表征。首先,以聚乙二醇衍生物m-PEG-P(AGE-MPA)为稳定剂,采用溶剂热法一步合成了铁酸钴(Co Fe2O4,CFO)纳米粒子,然后通过转铁蛋白(transferrin,Tf)与金属离子螯合作用制备了Co Fe2O4@Tf(CFOT)复合纳米粒子。通过XRD、FTIR、XPS、TEM、Zeta电位和DLS等对CFOT纳米粒子进行表征,证明了CFOT纳米粒子的结晶度高、粒径小(63.10±12.59 nm)、分散度好并带高的负电荷(-22.8 m V),具有很好的稳定性和水溶性。在808 nm激光的照射下该纳米粒子光热转换效率高达46.5%且光热稳定性优异。此外,亚甲基蓝(MB)降解实验和EPR实验证明了CFOT具有优异的化学动力学性能。第二部分,CFOT纳米粒子通过光热/化学动力学协同疗法用于肿瘤精准治疗。首先通过细胞实验对CFOT的体外抗肿瘤活性进行评价。MTT实验中在CFOT的作用下人肝细胞(L-O2)和人脐静脉上皮细胞(HUVEC)的存活率均高于80%,表明CFOT对正常细胞毒性小,具有优异的生物相容性和安全性。在细胞摄取实验以及H22移植瘤小鼠的体内离子分布实验中,CFOT纳米粒子在肝癌细胞(H22,Hep G2)以及H22肿瘤组织蓄积较多,体现CFOT纳米粒子优异的肿瘤特异靶向性。肝癌细胞的MTT实验、Annexin V-FITC-PI细胞凋亡流式实验、Calcein-AM/PI双染细胞实验中,在激光照射下CFOT纳米粒子导致了85%以上肝癌细胞死亡,其对肿瘤细胞的杀伤效果优于无Tf修饰的CFO。进一步开展的H22移植瘤Balb/c小鼠模型的治疗实验表明CFOT的光热/化学动力学协同的精准治疗策略具有很好的治疗效果,能有效的治愈移植型小鼠肝癌肿瘤。总之,本研究成功地合成了转铁蛋白修饰的CFOT纳米粒子,该纳米粒子具有良好的光热性能和化学动力学性能,生物安全性能优越,肿瘤靶向性明确,在光热-化学动力学疗法协同作用下能显著抑制体内移植H22肿瘤的生长。本课题可为肝癌的治疗提供一种新的治疗手段。
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