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金柚幼果包括生理落果和人工疏果,年产量大而利用率低,金柚幼果中含有多种活性物质包括类黄酮等,其含量远高于成熟的果实,且幼果的收集与加工相对容易,是金柚深加工原料的不二之选。因此,本研究采用超声-微波协同技术对金柚幼果黄酮类化合物的提取工艺进行优化,通过微波、超声等9个方法对总黄酮得率、细胞表面结构、黄酮成分、抗氧化能力的影响进行分析,同时,采用AB-8大孔树脂法对最优条件下的黄酮组分进行LCMS分析,并以AAPH诱导红细胞溶血模型探究其抗氧化能力及其机理。结果表明:(1)最优的超声-微波协同提取金柚幼果黄酮工艺条件:微波功率为410W,超声波功率为420W,液料比为11:1,提取时间为42min,通过验证得此工艺条件下总黄酮的得率达68.57%,与预测值70.03%接近。(2)超声-微波协同技术能有效提高总黄酮得率。而这与辅助提取方法对细胞空间结构的形成有直接关系,实验发现不同辅助提取方法均使原本呈平面结构的柚子粉发生不同程度的变化,其中温度、时间、功率、处理方法均为影响空间结构形成的重要因素。另外黄酮类物质的成分在不同辅助提取方法中也不尽相同,且总黄酮得率与黄酮类物质的种数没有直接关系;所有的处理组中均发现2’’-O-乙酰基-3’-O-甲基芦丁和柚皮苷两种黄酮类化合物。根据黄酮类化合物在不同处理组的分布进行聚类分析,发现超声-微波协同技术对黄酮类物质提取的明显区别于超声或微波单独处理,且M400+U400-40处理组差异更为显著。(3)以化学抗氧化法和AAPH诱导红细胞溶血模型考察提取物的抗氧化活性,证实所有的处理组均表现出卓越的ABTS、DPPH的自由基清除能力,以及一定程度的Fe离子的还原能力。各处理组的提取物均能抑制由AAPH诱导的红细胞溶血,且同一处理组的化学抗氧化能力与细胞抗氧化能力呈正相关关系。(4)AB-8大孔树脂纯化后得到CF黄酮组分,经LCMS分析其由柚皮苷、2’’-O-乙酰基-3’-O-甲基芦丁和5,7,8,3’-四羟基-3,4’-二甲氧基黄酮组成。经过CF预处理后,AAPH诱导的红细胞溶血受到抑制,并呈现明显的剂量依赖性。具体表现为MDA的生成量和LDH的溢出量均减少,说明细胞膜的完整性得到保护;GSH、GSSG和H2O2的含量与正常组无显著性差异,SOD和GSH-Px的活性显著性降低,说明红细胞未处于氧化应激状态。由此推断CF是通过直接清除自由基,从而抑制AAPH引起的红细胞溶血。