【摘 要】
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该文确定了核黄素的测定方法.核黄素样品采用碱溶解法进行预处理,使用十二烷基磺酸钠(SDS)作离子对试剂,采用反相离子对色谱法,在266nm处检测分析核黄素发酵液中的核黄素.该
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该文确定了核黄素的测定方法.核黄素样品采用碱溶解法进行预处理,使用十二烷基磺酸钠(SDS)作离子对试剂,采用反相离子对色谱法,在266nm处检测分析核黄素发酵液中的核黄素.该文研究了产核黄素基因工程菌Bacillussubtilis24/pMX4.5发酵的影响因素,确定了Bacillussubtilis24/pMX4.5发酵的最适种龄为21h,最适接种量6﹪,最适装瓶量25﹪,氮源采用酵母抽提物1.5﹪和尿素0.6﹪,温度采用41℃的变温发酵模式,变温点为40小时,明显地提高了核黄素的发酵单位.在此条件下发酵63小时,核黄素的发酵单位可达到4.538mg/mL,残糖为2.3﹪,其得主为0.06克核黄素/克葡萄糖.该实验对构建产核黄素的枯草芽孢杆菌基因工程菌的方法进行了探索,建立了菌株Bacillussubtilis24/pMX4.5的质粒提取、酶切、连接、转化、转化子筛选等基本实验方法,为今后构建高产核黄素基因工程菌的工作奠定了基础.
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