论文部分内容阅读
小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)是一种常见的食源性致病菌,Y.enterocolitica通过污染食物引起的食物中毒。目前,对于Y. enterocolitica在食品中的污染情况,国内外都有大量研究,但国内研究的调查食品种类仅集中在肉制品、速冻食品、等食品,对于水产品、蔬菜、熟食、食用菌、奶制品等的研究报道非常少见。本文系统研究了上海、合肥、南昌、武汉、成都、昆明、兰州、哈尔滨、西安、太原、北京、济南、广州(五区)、深圳、汕头、湛江、韶关、河源、福州、厦门、北海、南宁、海口和三亚共24个城市零售的肉与肉制品、水产品、速冻食品、食用菌、熟食、蔬菜和奶制品七大类食品中Y.enterocolitica的污染状况,同时以部分城市的分离株为研究对象开展了毒力基因、血清型和耐药性研究,并通过聚合酶链式反应来扩增肠杆菌基因间重复共有序列(enterobacterial repetitive intergenic consensus sequence polymerase chain reaction,ERIC-PCR)技术构建了Y.enterocolitica的指纹图谱,研究其遗传多样性,为预防和控制Y.enterocolitica的污染提供依据。1、七大类食品共采集1531份样品,共70份检出Y.enterocolitica,平均检出率为4.6%,仅三类食品中存在Y.enterocolitica污染现象,Y.enterocolitica在肉与肉制品、速冻食品、食用菌的检出率分别为9.8%、15.4%、1.8%;Y.enterocolitica在不同城市的污染程度也有很大差异,济南检出率最高为18.2%,而深圳和湛江未检出;从采样场所分析,超市检出率为5.2%,集市检出率为4.3%。2、通过对部分城市分离的72株Y.enterocolitica进行毒力基因分析,ail、ystB、ystA、virF和yadA的检出率分别为1.4%(1/72)、70.8%(51/72)、1.4%(1/72)、1.4%(1/72)和1.4%(1/72),分离株毒力基因分布不是广泛。针对常见五种血清型O:1,2、O:3、O:5、O:8、O:9进行分型,发现在分出血清型中O:9检出率为19.4%(14/72),O:3检出率为8.3%(6/72),O:8检出率为5.6%(4/72),O:1,2和O:3检出率为4.2%(3/72),其他菌株未分出血清型,分离株以O:9血清型为主。抗生素药敏实验结果发现,多重耐药菌株普遍存在,大部分Y.enterocolitica对三种以上抗生素耐药,表明从食品分离的菌株耐药性严重。3、以72株Y.enterocolitica分离株为研究对象,再进一步研究其遗传多样性,运用建立的ERIC-PCR反应条件对其进行分型,72株分离株可分为四个大簇共56个型,相似系数在0.42-1.00之间,反映出具有较高的遗传多样性,优势菌株主要集中在第三簇中。初步建立了Y.enterocolitica ERIC-PCR指纹图谱数据库,为建立食品中Y.enterocolitica的溯源体系污染提供数据支持。今后可以调整研究范围,更全面和更有针对性的去掌握重要食品中的相关污染情况,具体可以针对以下3个方面:研究Y.enterocolitica的快速检测技术、进行食品中Y.enterocolitica的定量研究,了解其污染水平和进行耐药基因检测来进一步研究。