目的：观察缺氧／复氧损伤后体外培养的星形胶质细胞兴奋性氨基酸转运体、谷氨酰胺合成酶的表达，以及亚低温干预对星形胶质细胞兴奋性氨基酸转运体、谷氨酰胺合成酶的影响，探讨亚低温对脑缺血再灌注损伤的可能保护机制。　　 方法：利用新生24小时内的SD大鼠，取脑皮层新鲜脑组织，参照McCarthy等的方法加以改进进行星形胶质细胞（astrocyte，AC）原代培养，调整细胞密度为1.0×105/cm2，接种到含胎牛血清培养基的培养瓶中，置于细胞培养箱内。7-8天后传代，传至第3代，细胞自然纯化后，采用神经胶质纤维酸性蛋白(gliafibrillary acid protein，GFAP)免疫荧光鉴定AC,97％以上为阳性细胞，符合实验要求。将AC分为正常对照组(C)、常温缺氧／复氧组(H/R)、哑低温缺氧／复氧组(H/M+R)。用三气培养箱以95％N2、5％CO2造成细胞缺氧，记缺氧损伤时间，缺氧12小时后分别调节温度37℃及32℃，开始记复氧时间。每组设复氧2h、4h、8h、12h、24h、48h6个时间点，建立AC缺氧／复氧模型。MTT测定细胞活力，比色法测谷氨酸( Glu)浓度及谷氨酰胺合成酶(GS)的活性，Western-blot法半定量分析EAAT2、GS的表达情况，免疫荧光染色观察EAAT2与GS表达情况。采用SPSS16.0统计软件包进行资料分析。　　 结果：1．体外纯化培养AC及GFAP鉴定结果：AC传至3代后，细胞突起较多而长，胞体较大而扁，细胞形态不规则，胞核多偏于一侧，多为椭圆形，GFAP免疫荧光染色显示绿色。2.MTT法检测细胞活力：(1)C组细胞活力无明显改变。(2)H/R组与C组比较细胞吸光度下降，细胞活力减低，随着时间延长细胞活力下降明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。(3)H/M+R组与C组比较细胞吸光度下降，与H/R组比较明显增加，细胞损伤减轻，差异有统计学意义（P＜0.05）。3．比色法测定GLU浓度：分别按各时间点测定各组谷氨酸浓度结果：(1)C组细胞谷氨酸浓度未见明显差异性交化。(2)H/R组与C组比较随着缺氧／复氧时间延长谷氨酸浓度呈现增多趋势，差异有统计学意义（P＜0.05）。(3)H/M+R组与C组比较谷氨酸浓度增多，与H/R组比较浓度则减少，差异有统计学意义（P＜0.05）。4．比色法测GS活性结果：(1)C组GS活性表达无明显异常。(2)H/R组GS活性表达与C组比较随时间延长表达上升，差异有统计学意义（P＜0.05）。H/M+R组GS表达活性上升，且较H/R组活性更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。5.Western-blot半定量检测结果：(1)C组EAAT2、GS表达变化不明显，各时间点问无统计学意义。(2)H/R组EAAT2表达量先减少，随着复氧时间延长逐渐增多，与C组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；GS的表达随着复氧时间延长，表达逐渐增多，与C组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。(3)H/M+R组EAAT2表达量先减少，随着复氧时间延长逐渐增多，与C组相比差异有显著性（P＜0.05），与H/R组比较表达量下降趋势减少，差异有统计学意义（P＜0.05）；H/M+R组GS表达量随着复氧时间延长，表达逐渐增多，与C组比较增多差异有显著性（P＜0.05），与H/R组比较增高趋势更加明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。6.GS与EAAT2免疫荧光结果：H/M+R组与H/R组比较GS表达增多，EAAT2表达下降趋势减少；GS表达增加时EAAT2表达减弱，差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 结论：1.缺氧／复氧可以引起星形胶质细胞损伤，细胞活力下降，释放谷氨酸浓度增高。缺氧／复氧可以引起星形胶质细胞EAAT2表达下降，GS表达上升。2．亚低温可以改善损伤后细胞活力，减轻缺氧／复氧对星形胶质细胞的损伤。3．亚低温抑制缺氧／复氧损伤后星形胶质细胞释放兴奋性氨基酸，可能与调节细胞EAAT2、GS表达有关，这可能是亚低温脑保护作用的重要机制之一。