滑菇杂交新品种选育、菌种质量评价及亲缘关系研究

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滑菇是美味珍稀的食用菌之一,同时又具有很高的药用价值,在我国许多地区都有栽培。河北省平泉县是我省滑菇主产区,其生产的滑菇畅销国内外,滑菇产业的发展对促进平泉的经济和社会发展起了重要的推动作用。但近几年,在滑菇生产上出现一些问题,这些问题可归结为两个方面:一是所用滑菇菌种普遍退化、老化,造成菇农栽培风险加大,经济效益下滑;二是滑菇菌种市场极为混乱。由于目前尚没有关于食用菌菌种质量评价的科学体系,菌种质量和产销管理薄弱,一定程度上造成了食用菌菌种杂、多、乱现象的发生,严重损害了菇农利益。为了解决以上问题,本研究首先利用当地两个滑菇主栽品种C3-1和早丰112作为亲本,采用传统的单孢杂交育种方法进行了滑菇杂交新品种的选育,以期获得同时具有双亲优良性状的新品种。同时,为了科学评价菌种质量,解决同种异名等现象,对平泉县提供的13个滑菇菌株的菌种质量进行了评价。此外,本论文还对从全国不同地区搜集到的16个滑菇主栽品种的分子标记和亲缘关系进行了研究。主要结果如下:1.通过单孢配对、杂交育种实验,共得到43个杂交组合;经过菌丝长势观察、生长速度测定及出菇试验筛选,最终筛选出1个菌丝长速快、污染率低、产量高的优良菌株,可以用于生产推广。2.采用生物化学技术对平泉县提供的13个滑菇菌株进行了质量评价,包括菌丝生长速度的比较,胞外酶(纤维素酶、木聚糖酶和漆酶)活力的比较,拮抗实验及酯酶同工酶实验。结果表明:在PDA加富培养基上生长较快的菌株是4号(SB2林盛)、5号(107林盛)和7号(C3-1林盛)菌株;在模拟出菇培养基上生长较快的是7号(C3-1林盛)、9号(C3-3林盛)和11号(470林盛)菌株。在胞外酶活力的测定中,纤维素酶活力较高的是1号(早生1号林盛)、4号、5号、和7号菌株,木聚糖酶活力较高的是1号、4号和7号菌株,漆酶活力较高的是7号、8号(C3-2林盛)和13号(112土肥站)菌株。综合考虑,7号菌株为优良菌株。3.通过拮抗实验和酯酶同工酶技术对平泉县提供的13个滑菇菌株的亲缘关系进行鉴定,初步表明,4号和11号(470林盛),6号(CTE林盛)和7号,12号(早生112)和13号菌株分别为相同的菌株,即为“同种异名”菌株。其它如1号、2号(早生2号林盛)和5号菌株,11号和13号菌株,6号和10号(C3-1森源)菌株的亲缘关系也很近;9号(C3-3林盛)菌株与其它各个菌株的亲缘关系较远。在相似系数0.80水平上13个滑菇菌株被聚为5类,第1类包括9号菌株,第2类包括6号、7号和10号菌株,第3类包括8号菌株,第4类包括3号(早生4号林盛)菌株,第5类包括1号、2号、4号、5号、11号、12号和13号菌株。4.通过酯酶同工酶技术和RAPD(randomly amplified polymorphic DNA)分子标记技术明确了全国16个滑菇品种间的亲缘关系,并且酯酶同工酶实验和RAPD分子标记所得到的16个滑菇菌种的亲缘关系基本一致,结果表明:5号(滑菇早壮)和7号(东北1号)菌株,10号(滑菇518)和14号(滑菇5188)菌株,12号(澳羽32)和15号(工羽3)菌株的相似系数都很高,即它们的亲缘关系很近;而16号(滑菇一号)菌株与其它各个菌株的亲缘关系都较远。通过2种方法的结果比较,表明酯酶同工酶技术和RAPD分子技术均为鉴定滑菇菌株亲缘关系可靠手段。
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