“移行吻合”治疗肝门部胆管良性狭窄的实验研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:gougou316
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第一部分移行吻合治疗肝门部良性胆管狭窄目的:探索“移行吻合术”治疗肝门部胆管良性狭窄新术式。通过动物实验和临床应用,得出肝门部胆管良性狭窄进行“移行吻合术”理论基础与实际应用可行性、适应症和禁忌症,寻找更符合生理解剖的手术方式。方法:小型猪50头,体重在15-20kg之间,由昆明医科大学动物科提供,常温下饲养,喂固体饲料,饮自来水。小型猪购回后在新环境中适应性饲养5-7天后再开始实验,术前禁食12h、禁水6h,称重、备皮。随机分为:A、B、C、D、E五组。术前均采用氯胺酮3%戊巴比妥复合麻醉。A组(对照组)手术:小型猪仰卧位,固定四肢,消毒后取上腹正中切口,长约10cm进腹。将肠管用纱布垫保护移出充分暴露肝门部,仔细分离找到胆总管,距十二指肠上缘约5cm处,分离出一段长约3cm的胆总管,关腹。B组手术:开腹分离胆总管同对照组,在分离段胆总管上用小弯钳钳夹,并用电凝触烧弯钳,给予胆管组织物理损伤,时间约3s,或观察钳夹胆管组织发白坏死即可,关腹。C组手术:开腹分离胆管制造狭窄同B组,待狭窄制造完成后,在局部放置中人氟安(5-FU的缓释剂),关腹。D组手术:开腹分离胆管制造狭窄同B组,关腹,术后监测小型猪的饮食二便,及肝功能,胆红素等指标,待狭窄形成后再次麻醉开腹,找到狭窄位置,充分显露狭窄段胆管并向上下延长一段,充分剪开狭窄段并切除大部分狭窄瘢痕组织,根据整形美容皮瓣移行修复原理,把两狭窄断端基本正常胆管组织“Z”型拼合整形、外翻并移行缝合。E组手术:开腹分离胆管制造狭窄解除狭窄同D组,移行吻合术后,在局部放置中人氟安。术后观察饮食、精神状态及尿液颜色,术前和术后一天及术后每7天测ALT. AST、T-BIL、D-BIL,全部手术完成三个月后处死,取瘢痕组织和部分肝组织,并用液氮保存,待做病理检查,及PCR定量分析。统计学采用SPSS软件t检验及多元方差分析。结果:术后4-6h小型猪能翻身自主饮水,以后逐渐恢复饮食,术后7天后尿液开始变黄并逐渐加深。①从术前到术后30天,除对照组外其他组检测ALT、AST、 T-BIL、D-BIL等指标有明显变化(P<0.05);而B组术后21天的ALT、T-BIL、D-BIL较术前及14天明显升高。C组值较B组稍低,D组行移行吻合术后,各项指标在二次术后14~21天二次术前明显减低,E组二次手术一月后的各项指标较E组稍低。②处死小型猪切取肝脏及胆管行病理学检查,除对照组外随着时间推移发现肝细胞有不同程度损伤,胆管组织部分纤维增生;而对照组术前与术后对比无明显变化。结论:通过“移行吻合术”治疗小型猪肝门部胆管良性狭窄是切实可行的,有利于减少术后胆管的再狭窄及结石复发,为临床肝门部胆管狭窄的治疗提供了实验基础。第二部分局部应用中人氟安对良性胆管狭窄形成影响的研究目的:通过动物实验动物实验所取得的标本,做实时荧光PCR定量分析,探索5-FU抑制瘢痕增生的效果,预防良性胆管狭窄的形成。方法:第一部分制造胆管良性狭窄模型的小型猪共50头,处死后,取瘢痕组织并用液氮保存,经过样品RNA的提取,RNA的检测样品CDNA的合成及电泳做实时荧光PCR定量分析。分析与瘢痕组织形成密切相关的TGF-β1、PDGF、CTGF的因子表达量。结果:实验组β、D组(未用中人氟安)的TGF-β1、PDGF、CTGF因子表达量明显高于对照组A组,同样显著高于实验组C、E组(局部放置中人氟安)。实验组C、E组(局部放置中人氟安)三个因子表达量在高于对照A组的同时,明显低于实验组β、D组(未用中人氟安)。结论:5-FU对胆管损伤后瘢痕的增生有明显的抑制作用,为进一步进行活体胆管损伤后瘢痕的预防和治疗提供了依据,为临床肝门部胆管狭窄的治疗提供了实验基础。
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