【摘 要】
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有机磷农药,作为一类常见的杀虫剂,因在农作物保护方面具有高效杀虫性能而被广泛使用。有机磷农药具有强蓄积性,操作不当或超量使用会残留在作物及环境中,对人体健康造成潜在风险。对于农残检测目前常用方法有快速检测法和仪器分析法,其中酶抑制法因快速定性、操作简便而被普及使用。但是传统酶抑制法的局限性在于使用的天然酶易受环境影响,检测结果易出现假阳性、假阴性等现象。针对上述问题,本论文选取具有类酶活性和荧光双
【基金项目】
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吉林省科技发展计划重点研发《20210203182SF》; 吉林省农业科技创新工程《CXGC2021TD006》
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有机磷农药,作为一类常见的杀虫剂,因在农作物保护方面具有高效杀虫性能而被广泛使用。有机磷农药具有强蓄积性,操作不当或超量使用会残留在作物及环境中,对人体健康造成潜在风险。对于农残检测目前常用方法有快速检测法和仪器分析法,其中酶抑制法因快速定性、操作简便而被普及使用。但是传统酶抑制法的局限性在于使用的天然酶易受环境影响,检测结果易出现假阳性、假阴性等现象。针对上述问题,本论文选取具有类酶活性和荧光双重性质的金纳米酶替代天然酶,利用有机磷农药（甲基对氧磷、乐果、毒死蜱）对乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase,ACh E）的抑制作用,通过多酶级联催化反应转化,对金纳米簇（Gold nanoclusters,AuNCs）的酶学活性及荧光性质产生影响,构建了两种信号输出的农药检测方法（紫外信号（1）、荧光信号（2））。通过双信号间的相互验证实现对有机磷农药的高效、定量检测,同时优化酶抑制法的检测限及准确性。主要研究内容如下:1.利用牛血清白蛋白（Bovine serum albumin,BSA）作为保护剂,通过其表面半胱氨酸的还原作用,可控制备了金簇纳米酶（BSA-AuNCs）,通过透射电子显微镜（Transmission electron microscopy,TEM）、紫外分光光度计（Ultraviolet–visible Spectrophotometer,UV）、高分辨紫外光电子能谱（X-ray photoelectron spectroscopy,XPS）分析表征了BSA-AuNCs的形貌、尺寸、元素组分及元素价态。2.对BSA-AuNCs进行酶学、光学性质表征:通过稳态动力学测试和二级数列常数计算,结果表明BSA-AuNCs具有相对良好的酶学活性;此外,BSA-AuNCs还表现出优异的荧光性质,通过荧光分光光度计表征了其最大激发波长和发射波长;通过稳态瞬态荧光仪表征BSA-AuNCs的荧光寿命。3.通过构建的双信号检测方法实现了对甲基对氧磷、乐果、毒死蜱的痕量检测,并测定了该方法对上述农药的最低检测限、线性范围、相关系数和抗干扰能力。此外,运用4种果蔬作为实际样品进行检测,对比研究了传统速测卡检测方法和液质联用仪（Liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS）与本论文构建的新方法的准确性、检测精度等指标,证明本方法在有机磷农药痕量检测方面的优势。
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