玉米琥珀酸脱氢酶的纯化及与钙调素关系的研究

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该实验以玉米黄化苗为材料,经过差速离心得到线粒体,超声破碎后,0.2﹪脱氧胆酸钠溶膜,超速离心,其上清液透析后,进行阴离子交换层析和分子筛层析,纯化了琥珀酸脱氢酶,纯化倍数为64,其聚丙烯酰胺凝胶电泳表现为一条主带.对各个提取步骤的样品进行CaM与SDH活性关系的研究,结果表明:外源CaM可以激活纯化的酶,而CaM抗体和CaM拮抗剂则对纯化SDH活性无影响.说明SDH活性受CaM的影响,纯化的SDH中不含CaM.ELISA法检测结果也表明纯化的样品中不含CaM.蛋白印迹实验表明过Sephadex G-100的SDH中含一个65KD的CaMBP,它与SDH大亚基FP位置相当.CaM可能通过FP调节SDH的活性.
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