目的:扩增hRev7绿色荧光质粒,,转染N2A细胞和神经元细胞,并初步探讨hRev7对神经元的凋亡的作用机制。方法:通过细菌接种,感受态细胞的制备,质粒的转化,摇菌扩增,提取质粒,在荧光拍照系统中看其条带,并用分光光度仪对其纯度进行测试,扩增构建于绿荧光载体于PEGFP-1中hRev7,培养N2A细胞,Lipofectamin2000瞬时转染N2A细胞,Annexin V-APC标记凋亡细胞,流式细胞仪检测hRev7对细胞凋亡的影响。结果:(1)通过通过细菌接种,感受态细胞的制备,质粒的转化,摇菌扩增,提取到较高纯度的的质粒。(2)利用含hRev7带绿荧光的质粒瞬时转染N2A细胞后通过流式细胞检测仪检测,转染pEGFP—N1—hRev7的细胞,凋亡率为14.8,而转染pEGFP—N1的细胞其凋亡率为6.5,经统计学分析,差异具有显著性(p<0.05),不拒绝原假设,即实验组凋亡率与对照组凋亡率差异有显著性。数据结果显示与对照空白质粒组相比较hRev7促进了细胞的凋亡。结论:扩增PEGFP-hRev7质粒,通过流式检测表明,瞬时转染hRev7,能促进N2A细胞的凋亡,为进一步的研究唐氏综合症及hRev7对神经元的凋亡影响机制奠定了基础。