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目的：观察方氏头针对失眠大鼠海马和下丘脑内氨基酸类神经递质和C-Fos蛋白表达的影响，揭示方氏头针治疗失眠可能的作用机制，为方氏头针临床推广应用提供理论依据。 方法：将48只健康雄性SD大鼠按1:3比例随机分为空白组、造模组；造模组采用PCPA法造模，将PCPA配置成混悬液（300mg/Kg），大鼠腹腔注射该混悬液（1mL/100g），连续2天，建立失眠大鼠模型，将造模成功后的失眠大鼠随机分为三组：模型组、西药组、方氏头针组，加上空白组共四组。方氏头针组取穴：伏脏上焦（双）、思维穴、记忆穴（双）；西药组：地西泮（0.92mg/kg）混悬液灌胃。空白组和模型组均：均灌服生理盐水，1mL/100g，以上4组均每天干预1次，总共干预5天，5天后断头处死取相应脑组织。应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠海马和下丘脑内GLU、GABA的含量；应用免疫组化检测大鼠海马和下丘脑C-Fos蛋白的表达。综合评价方氏头针对失眠大鼠的疗效。 结果：1.酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠脑内GLU结果显示：海马与下丘脑区，模型组与空白组比较，GLU含量均明显高于空白组，二者有显著性差异(p＜0.05)；西药组、针刺组同模型组相比，GLU含量均降低，二者有显著性差异(p＜0.05)；针刺组与西药组比较，GLU含量无显著性差异(p＞0.05)。 2.酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠脑内GABA结果显示：海马与下丘脑区，模型组与空白组比较，GABA含量均明显低于空白组，有显著性差异(p＜0.05)；西药组、针刺组同模型组相比，GABA含量均升高，二者有显著性差异(p＜0.05)；针刺组与西药组比较，GABA含量无显著性差异(p＞0.05)。 3.免疫组化法检测C-Fos蛋白的表达结果提示，不同组别间差异有统计学意义（p＜0.05），经LSD两两比较发现空白组与模型组比较，海马和下丘脑区c-fos蛋白表达光密度值模型组高于空白组，差异有统计学意义(p＜0.05)；模型组与方氏头针组比较，海马和下丘脑区C-fos蛋白表达光密度值方氏头针组低于模型组，差异有统计学意义(p＜0.05)。 结论：1.通过方氏头针干预失眠模型大鼠，使失眠大鼠海马和下丘脑内GLU明显降低，GABA明显升高，大鼠失眠得到改善，验证了失眠与GLU和GABA两种神经递质的平衡密切相关。 2.通过方氏头针干预失眠模型大鼠，使失眠大鼠海马和下丘脑内C-Fos蛋白的表达降低，从而改善睡眠。 3.实验中通过观察各项指标，发现方氏头针对失眠大鼠睡眠的改善可能是通过调节脑内氨基酸类神经递质的平衡而发挥作用的。