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目的:多种受体酪氨酸激酶蛋白在恶性肿瘤的发生发展过程中起重要作用。其中,EGFR在头颈鳞癌中广泛表达,是其最重要的治疗靶点。我们前期课题研究发现RET在口腔鳞癌组织中高表达。已知高表达的RET不仅影响一些恶性肿瘤发展、预后,且与EGFR家族分子存在相关。本项目旨在前期工作基础上,进一步研究RET在口腔鳞癌发展中的作用,并初步探讨RET与口腔鳞癌EGFR抑制剂敏感性的相关性。方法:基于TCGA数据库分析头颈鳞癌中RET基因突变以及转录情况;通过蛋白免疫印迹检测8对口腔鳞癌组织和配对癌旁正常组织中RET表达水平,免疫组织化学染色检测RET在145例口腔鳞癌中的表达与临床病理、预后相关性;通过干扰RET在细胞系中表达,检测RET对口腔鳞癌细胞的生物学功能方面影响;通过裸鼠移植瘤技术,检测RET对肿瘤生长的影响;进而分别通过干扰RET和EGFR表达,检测RET与EGFR信号通路间的相关性;检测RET与p-EGFR(1068)在口腔鳞癌样本中表达水平;通过干扰RET表达,明确RET对口腔鳞癌细胞厄洛替尼敏感性的影响;通过细胞学、裸鼠移植瘤模型,明确联合应用RET抑制剂增强厄洛替尼对口腔鳞癌的抑制效果。结果:RET在口腔鳞癌组织中表达显著上调,RET与肿瘤大小、临床分期以及预后相关。在口腔鳞癌细胞系中干扰RET表达,能明显抑制肿瘤细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移能力,以及细胞周期阻滞和细胞凋亡,同时RET表达下调明显抑制口腔鳞癌细胞的裸鼠移植瘤的生长。通过蛋白免疫印迹技术发现干扰RET表达可以显著抑制p-EGFR(1068)及其下游信号通路分子活化,而在临床样本中发现RET蛋白表达水平与p-EGFR(1068)呈显著正相关;口腔鳞癌细胞系厄洛替尼半抑制浓度IC50值与细胞系中RET蛋白表达水平正相关,下调RET蛋白表达可显著增强厄洛替尼对口腔鳞癌细胞的生长抑制作用;应用RET抑制剂瑞戈非尼能2-3倍提高厄洛替尼对口腔鳞状细胞癌细胞的生长抑制作用,而裸鼠移植瘤模型也发现,瑞戈非尼与厄洛替尼联合用药较单独用药能明显提高对移植瘤的生长抑制作用。结论:高表达的RET蛋白不仅与口腔鳞癌的临床分期、预后相关,而且可影响EGFR及其下游信号通路的磷酸化;靶向抑制RET不仅可以抑制肿瘤的生长,更能增强厄洛替尼对肿瘤的生长抑制作用。靶向抑制RET可提高肿瘤细胞对EGFR抑制剂的敏感性,RET是增强EGFR抑制剂厄洛替尼治疗效果的潜在辅助治疗靶点。