发热伴血小板减少综合征病毒（Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV）属于布尼亚病毒科,白蛉病毒属成员。该病毒最早是在中国发现,随后在日本、韩国和美国也报道了该病毒。SFTSV主要通过蜱虫叮咬感染人类,感染后引起发热伴血小板减少综合征（Severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS）,死亡率在6%至30%之间。自2009年SFTSV被发现以来,在我国23个省均报告了SFTSV感染病例,并且每年呈上升趋势。SFTSV具有广泛的宿主范围,在流行地区可感染多种动物,研究人员在疫区多种家养及野生动物中均检测到病毒核酸。流行病学调查发现,在SFTSV核酸检测为阳性动物身上采集到的蜱也能检测到核酸阳性,证明了蜱是其传播媒介。目前对于SFTSV感染既无有效的疫苗可以预防,也没有特效药物可以治疗,在临床上只能进行对症治疗。因此,建立一种易于操作和灵敏度高的检测方法,对于SFTSV的防控显得尤为重要。本研究首先根据SFTSV的Rd Rp基因设计引物和探针,构建了含有目的片段的标准质粒。通过对反应的体系和条件进行优化,建立了检测SFTSV的实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示当质粒标准品浓度为4.22×10~2-4.22×10~9 copies/μL时,标准曲线的Ct值与模板之间的线性关系较好,相关系数可达0.9998。该方法对发热伴血小板减少综合征病毒最低检测限为4.22×10~1copies/μL,灵敏度是常规RT-PCR的100倍;该方法可特异性地检测出SFTSV,而对同科其他病毒检测结果均为阴性;重复性好,批内、批间变异系数均小于2%。对采集的200只蜱进行检测,实时荧光定量RT-PCR方法的阳性检出率为3.5%,而常规RT-PCR方法的阳性检出率仅为2%。说明本研究建立的检测方法具有较高的特异性、灵敏度和重复性,更适用于SFTSV的临床样品检测。用建立的实时荧光定量RT-PCR方法对采集自黑龙江地区的200份牛血清进行SFTSV的检测,发现SFTSV的阳性血清样品共17份,阳性率为8.5%。为了评估SFTSV对雪貂的致病性,分别通过皮下注射和点眼的方式接种雪貂6只,接种剂量为200μL的SFTSV病毒液(107.6 TCID50/m L)。结果显示感染SFTSV的雪貂出现了发热,体重下降,血小板计数和白细胞数量减少等典型症状。组织病理学观察显示感染组的雪貂脾脏中红髓部分出现幼稚红细胞增多和含铁血黄素沉积现象,脑组织中部分神经元细胞发生变性,胶质细胞增生,在小血管周围观察到胶质细胞浸润,胃中可见部分腺泡细胞变性坏死。随后利用本研究建立的实时荧光定量RT-PCR方法检测感染SFTSV雪貂的组织器官和血清中的病毒载量,发现在所有的组织器官和血清中均检测到了病毒核酸。在感染组雪貂中,脾病毒载量最高,其次是胃和脑,说明脾可能是SFTSV的易感器官。所有组织的病毒载量在第6天时达到峰值,随后逐渐下降。血清的病毒载量也是在第6天达到最高,随后开始下降,本研究成功建立了SFTSV感染雪貂的动物模型。本研究成功建立了一种操作方便、灵敏度高的实时荧光定量RT-PCR检测方法,可以用于临床SFTS的检测,为SFTS流行病学监测提供了技术手段;并研究了SFTSV对雪貂的致病性,为日后对SFTSV致病机制的进一步研究及抗病毒药物和疫苗的筛选奠定了基础。