论文部分内容阅读
研究目的：本研究旨在探讨：①健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721增殖的影响；②健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2的凋亡的影响；③探讨健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2凋亡的机制。研究方法：①MTT法,观察健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721后对其增殖的影响；②AnnexinV/PI双染色法,观察健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2凋亡的影响；③DCFH-DA探针法,观察健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2活性氧水平的改变；④Hochest33342染色,观察健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2细胞形态的改变；⑤透射电镜观察,健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2细胞超微结构的改变；⑥实时荧光定量PCR法,检测健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2的凋亡相关基因表达的影响；⑦免疫印迹法,检测健脾消癥方对人肝癌细胞株HepG2的凋亡相关蛋白表达的影响。研究结果：①各浓度的健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721均有不同程度的抑制作用；②健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG248h后出现明显的早期凋亡；③健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG248h后,细胞内活性氧浓度升高；④健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG248h后,细胞形态出现凋亡特点；⑤健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG248h后,细胞超微结构呈凋亡改变。⑥健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG248h后,Bak、Bax基因表达上调,Bcl-2、Survivin基因表达下调；⑦健脾消癥方作用人肝癌细胞株HepG248h后,Bax、caspase-3、caspase-9蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调。研究结论：①健脾消瘤方有体外抑制肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721的增殖作用；②健脾消癥方通过线粒体途径诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡；③健脾消癥方上调Bak、Bax基因表达,下调Bcl-2、Survivin基因表达；④健脾消癥方能下调Bcl-2蛋白,上调Bax、caspase-3、caspase-9蛋白。