复方中药添加剂影响仔猪肠道炎症、菌群结构和营养物质表观消化率的研究

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本试验旨在探究小建中加减复方和荆防败毒散对仔猪结肠炎症信号通路TLR4/My D88/NF-κB,盲肠微生物菌群结构和饲料营养物质表观消化率的影响。试验选取18头40日龄,体重相近的“杜×长×大”三元杂交仔猪,按照公母各半的原则随机分为3组,每组6头。其中对照组(Control)饲喂基础日粮,小建中加减复方组(TCM1)和荆防败毒散组(TCM2)分别在基础日粮中添加10 g/kg小建中加减复方和3g/kg荆防败毒散,预试验5 d,正式试验60 d。统计试验期间仔猪腹泻指数,计算腹泻率;测定营养物质表观消化率、结肠和盲肠内容物p H;利用RT-q PCR和Western blot测定TLR4/My D88/NF-κB信号通路炎症相关基因转录和蛋白表达;对盲肠内容物进行16S-r RNA高通量测序分析。试验结果表明:(1)与Control组相比,TCM1和TCM2组腹泻率显著降低(P<0.01);而中药组之间腹泻率无显著差异(P>0.05);中药干预后结肠、盲肠p H值均有不同程度的降低;TCM1组结肠和盲肠p H值分别降低7.85%(P<0.05)和11.54%(P<0.01);TCM2组结肠和盲肠p H值分别降低1.81%(P>0.05)和8.73%(P<0.01)。(2)与Control组比较,TCM1组显著升高CP(5.04%,P<0.01)、CF(6.63%,P<0.01)、NDF(12.04%,P<0.01)、ADF(17.12%,P<0.01)、Ca(6.56%,P<0.01)和P(6.31%,P<0.05)的表观养分消化率;TCM2组CP、NDF、ADF消化率分别上升2.56%(P<0.05)、7.10%(P<0.05)、13.64%(P<0.01),但未影响CF、ADF、Ca、P消化率水平(P>0.05)。(3)与Control组相比,TCM1组显著降低TLR4和My D88的m RNA相对表达量(P<0.05);TCM2组显著降低My D88(P<0.01)和NF-κB(P<0.05)基因m RNA相对表达量;并且,TCM1和TCM2均显著抑制NF-κB(P<0.05或P<0.01)、p-NF-κB(P<0.01)和p-IκB-α(P<0.05或P<0.01)蛋白表达,而显著提高IκB-α(P<0.05或P<0.01)的蛋白表达水平。(4)与Control组相比,TCM1和TCM2组中IL-6(P<0.01)、IL-8(P<0.01)和TNF-α(P<0.05或P<0.01)基因表达量均显著下降,IL-10 m RNA水平均显著升高(P<0.01);与TCM2组相比,TCM1组IL-8和TNF-α基因表达量显著降低(P<0.05),IL-10 m RNA表达量显著上升(P<0.01)。(5)与Control组相比,在门水平上,TCM1显著提高Actinobacteria和Cyanobacteria菌门的绝对丰度(P<0.01),而TCM2组仅Actinobacteria菌门丰度显著升高(P<0.01);在属水平上,TCM1和TCM2组均显著提高Eubacterium、Bifidobacterium和Streptococcus菌属的绝对丰度(P<0.05或P<0.01),而Bulleidia菌属(P<0.01)的丰度仅在TCM1组中显著升高,Turicibacter菌属(P<0.05)的丰度仅在TCM2组中显著降低。综上所述,小建中加减复方和荆防败毒散能够通过降低肠道p H值,改善肠道整体健康水平来降低仔猪的腹泻率和提高营养物质表观消化率。其可能的机制是中药复方添加剂直接或间接地抑制TLR4/My D88/NF-κB炎症信号通路的活性,缓解仔猪肠道炎症和提高肠道有益菌属的丰度。
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