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目的:研究新生儿病区碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant K.pneumoniae,CRKP）的耐药机制,为精准治疗和感染防控提供依据。方法:收集2016年6月至2016年12月新生儿病区新出现碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌。剔除同一患者重复送检的菌株后,累计6株CRKP纳入本研究。细菌鉴定及药敏试验采用VITEK-2 Compact全自动分析系统;患者临床病例资料的收集通过本院电子病历系统;微量肉汤稀释法检测细菌对待测抗菌药物的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）;PCR扩增联合测序技术检测产碳青霉烯酶基因(blaKPC,bla IMP,blaVIM,blaNDM,blaOXA-48)、ESBLs基因（blaCTX-M-1G,blaCTX-M-2G,blaCTX-M-8G,blaCTX-M-9G,blaSHV,blaTEM,blaOXA-1）、喹诺酮类抗生素耐药基因（qnrA,qnrB,qnrS,aac-（6’）-Ib-cr）、氨基糖苷类抗生素耐药基因（rmtB、armA）和多粘菌素耐药基因（mcr-1）;脉冲场凝胶电泳（PFGE）及多位点序列分型（MLST）技术分析菌株的同源性;质粒结合试验、S1-PFGE和Southern印迹杂交方法分析携带NDM-1质粒的分子特征。结果:新生儿病区新发现的碳青霉烯酶耐药的肺炎克雷伯菌均携带blaNDM-1,药敏结果显示6株菌除对多粘菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类和替加环素抗生素敏感外,对所有包括碳青霉烯类在内的b-内酰胺类抗生素都耐药。MLST分型结果显示6株菌分属于2个ST型,即ST234和ST1412型,PFGE分型结果显示新生儿病区有2种类型克隆株,但分散分布在不同的时间段,未见聚集性传播,且从孵箱表面、婴儿的头围皮尺、血气分析机表面、医务工作者相关部位未分离到CRKP同源株。质粒接合实验显示大部分菌株（n=4）能通过接合将blaNDM-1传播给受体菌E.coli J53,导致受体菌对所有碳青霉烯类抗生素产生耐药性,4株携带blaNDM-1肺炎克雷伯菌的耐药基因主要存在于大小为33.3-78.2kb的质粒,具备潜在的克隆传播能力。结论:新生儿病区碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌主要分为ST234和ST1412两个分子类型,其耐药机制为产NDM-1型金属β内酰胺酶,未发现耐药菌的集聚流行。但NDM-1型耐药基因可通过质粒传播,因此,加强新生儿病区抗生素合理使用和采取规范的感染控制措施尤为重要。