胶质类芽孢杆菌的多糖产量优化及其在家禽养殖中的应用

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胶质类芽孢杆菌是一类具有溶磷解钾、固氮、絮凝作用的硅酸盐细菌,广泛应用于微生物肥料、水体净化及生物选矿等领域。胶质类芽孢杆菌的重要特征是在无氮培养条件下产生大量的荚膜多糖,为了探究胶质类芽孢杆菌荚膜多糖产量的影响因素及其在饲料工业中的应用潜力,本论文优化了胶质类芽孢杆菌多糖的产生条件,并初步研究了荚膜多糖在家禽饲养中的作用。首先,采用单因素实验方法,分析了蔗糖、K2HPO4、CaCO3添加量对多糖产量的影响,并对发酵液黏度和多糖产量进行检测。结果表明,发酵液黏度和多糖产量在蔗糖添加量为0.5%~3.5%范围内,会随蔗糖添加量增加而升高,添加2.5%蔗糖,多糖产量为9.61±0.04mg/ml,当蔗糖添加量达到3.5%时,多糖产量为9.66±0.03mg/ml,变化不大,确定蔗糖添加量范围为:0.5%~2.5%;发酵液黏度和多糖产量在K2HPO4添加范围为0.05%~0.35%时,随K2HPO4添加量的增加先升高后降低,K2HPO4添加量在0.15%时,多糖产量达到最高5.25±0.04mg/ml,确定其添加范围为:0.05%~0.15%;CaCO3添加量为0.2%~0.55%范围时,发酵液黏度和多糖产量随CaCO3添加量增加先升高后降低,添加0.35%CaCO3发酵液黏度和多糖产量均达到最大值,分别为2553.33±25.17mp.s和4.400.05mg/ml,添加量达到0.45%后,黏度值不再变化,多糖产量为4.15±0.06mg/ml,确定CaCO3添加范围为:0.2%~0.45%。根据单因素实验结果设计三因素三水平正交试验,最终获得三种组分添加量的最优组合,2.0%蔗糖,0.1%K2HPO4,0.4%CaCO3;发酵液黏度和多糖产量分别为2568.24mp.s和11.32mg/ml。根据发酵条件优化结果,确定多糖产量较高的发酵时间为72h,发酵温度为32℃。其次,通过将胶质类芽孢杆菌多糖添加到黄鸡基础饲粮中,分析胶质类芽孢杆菌多糖对黄鸡生长性能、免疫器官指数、死淘率和肠道菌群数量的影响。结果表明,与对照组比较,基础饲粮中添加4.0g/kg的胶质类芽孢杆菌多糖能显著提高黄鸡的日均体重增重(P<0.05),日均体重增重提高了9.57%,添加4.0g/kg多糖能显著降低料重比和死淘率(P<0.05),料重比降低了3.4%;添加2.0与6.0g/kg胶质类芽孢杆菌多糖显著提高了黄鸡3~4周及整个试验期的日均体重增重,降低了料重比(P﹤0.05);与对照组比较,饲粮中添加2.0、4.0和6.0g/kg的胶质类芽孢杆菌多糖均能显著提高免疫器官指数(P<0.05),其中添加4.0g/kg多糖的效果最好,胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数分别提高了22.49%、18.51%和23.81%,表明胶质类芽孢杆菌多糖能促进黄鸡免疫器官的发育。同时,使用PCR-DGGE技术对黄鸡肠道菌群进行微生态分析。结果显示,饲粮中添加不同水平的胶质类芽孢杆菌多糖对黄鸡肠道菌群数量及某一类菌的数量会产生一定的影响,其中以添加胶质类芽孢杆菌多糖饲喂黄鸡的试验组,黄鸡肠道菌群数量少于对照组。通过割胶回收测序及BLAST比对,发现添加胶质类芽孢杆菌多糖的试验组黄鸡肠道内盲肠肠球菌数和肠道沙门氏菌数均低于对照组,而约氏乳杆菌数差异不明显。可见,添加多糖对鸡肠道菌群有一定的影响,但具体详实的数据还有待今后系统的定性和定量分析。综上所述,在优化培养基中胶质类芽孢杆菌可产生较高的多糖。用4.0g/kg多糖饲喂黄鸡,有效增加体重并降低料重比,表明该多糖在家禽饲养中具有一定的应用潜力。胶质类芽孢杆菌多糖可能是通过调节黄鸡的免疫功能及肠道菌群而发挥作用,但这有待进一步验证。
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