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光合作用是地球上最重要的化学反应,是所有生命活动能量的最终来源。藻胆体(phycobilisome)是藻类进行光合作用的主要场所,它由藻胆蛋白(phycobiliprotein)和连接蛋白组成。 光合作用中,能量在藻胆体内的传递顺序为PE→PC→APC→Chla,别藻蓝蛋白(APC)是能量传递链的重要部分。apcE所编码的LCM连接多肽可以帮助别藻蓝蛋白进行光能传递。基因apcE前端210bp编码的蛋白是LCM中直接与膜结合的部分。在从APC到Chla的传递过程中,能量需要分别传递到光反应中心PSⅠ和光反应中心PSⅡ中,apcE基因所编码的LCM连接多肽在能量从APC传递到PSⅡ的过程中起到了相当关键的作用。 本研究成功构建质粒pBT-apcE。利用TaKaRa MutanBEST Kit定点突变试剂盒成功构建ApcE(1-70)缺失体。使用部分酶切法构建集胞藻PCC6803的基因组文库。 将pBT-apcE和pTRG-apcF、pBT-apcE(1-70)和pTRG-apcF共转化大肠杆菌,利用细菌双杂交系统,证明ApcE与ApcF之间没有相互作用,而ApcE(1-70)与ApcF之间存在相互作用。使用ApcE作为诱饵蛋白,在基因组文库中钓取与其有相互作用的靶蛋白。获得单独的靶蛋白质粒后,将其测序,并通过同源性搜索确定与ApcE有相互作用的蛋白质。