通过基因工程调节物质流向提高油菜种子含油量

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油菜是我国最重要的四大油料作物之一,菜籽油占我国人民食用消费植物油的35%以上,是我国最重要的食用植物油。中国油菜栽培面积和产量均居世界第一位。油菜单产也已接近世界先进水平。作为品质评定的重要指标之一——高含油量,开始成为油菜育种者关注的热点。本文主要从基因工程角度出发,运用RNA干扰技术,从调节油分合成的相关的生化途径着手,构建了八种植物hpRNA表达载体,并分别对甘蓝型油菜华双4号进行了农杆菌介导的遗传转化。以期探索油菜种子油分形成过程中物质与能量代谢的相互关系,为提高油菜和其他油料作物种子含油量的研究提供一些有益的信息。主要成果如下: 1 构建了干扰糖酵解途径关键酶(Pyrophosphate-dependent phosphofructokinase)的组成型和种子特异性hpRNA植物表达载体,并分别对甘蓝型油菜华双4号进行了农杆菌介导的遗传转化。转化苗经过PCR鉴定和Southern杂交鉴定,春化后移入温棚开花,结籽。 2 构建了干扰光呼吸途径关键酶乙醇酸氧化酶(Glycolate oxidase)的组成型和种子特异性的hpRNA植物表达载体,并分别对甘蓝型油菜华双4号进行了农杆菌介导的遗传转化。转化苗经过PCR鉴定,春化后移入温棚开花,结籽。 3 构建了干扰主要油菜种子贮存蛋白cruciferin、oleosin和napin合成的三种种予特异性hpRNA植物表达载体,并分别对甘蓝型油菜华双4号进行了农杆菌介导的遗传转化。转化苗经过PCR鉴定和Southern杂交鉴定,春化后移入温棚开花,结籽。同时进行了hpRNA-cruciferin转化苗和hpRNA-napin转化苗的有性杂交。 4 构建了干扰丙酮酸羧化酶(PEPC)合成的种子特异性植物表达载体,并分别对甘蓝型油菜华双4号进行了农杆菌介导的遗传转化。转化苗经过PCR鉴定和Southem杂交鉴定,春化后移入温棚开花,结籽。
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