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本课题围绕着“应激-AMPK-食欲”研究主题展开了以下研究,主要是探讨AMPK在应激肉鸡的食欲调控中的作用。应激对肉仔鸡下丘脑食欲及AMPK信号通路的影响。试验选取1日龄体重相近AA肉仔鸡144只,随机分为3个处理(6个重复/8只鸡)。试验分为对照组、应激组、应激抑制组。7日龄进行试验处理,处理时间持续7天。试验结果显示:日粮中添加皮质酮显著降低了14日龄肉仔鸡体增重;皮质酮处理显著降低心脏指数、脾脏指数和法氏囊指数,相反,显著提高了肝脏指数和腹脂率;皮质酮组血浆中皮质酮、葡萄糖、甘油三酯、肝糖原和胸肌糖原的含量与对照组相比显著升高;与对照组相比,日粮中添加皮质酮显著上调14日龄肉仔鸡下丘脑中mTOR、GR、AMPKα2、NPY、LKB1、AMPKα1、FAS基因表达量,ACC蛋白的磷酸化水平在饲喂皮质酮时显著提高,同时AMPK总蛋白及磷酸化水平也显著提高。由此可见,应激导致肉鸡体重降低,糖元异生过程加强;应激反应通过提高促食神经肽NPY基因表达促进食欲,同时激活了中枢LKB1-AMPK-ACC信号通路。中枢注射Compound C对应激肉鸡食欲和能量代谢的影响。试验选取体重相近的AA肉仔鸡48只,7日龄进行脑室埋管,随机分为4个试验组(6个重复/2只鸡):DEX+Compound C组、DEX组、Compound C组、对照组。8日龄早上8:00 DEX处理组皮下注射地塞米松,对照组注射等剂量的生理盐水,连续注射3天。10日龄注射后空腹3小时,Compound C组注射Compound C、对照组注射等剂量的DMSO,每隔30分钟统计一次采食量,连续统计120分钟。根据采食量数据,重复上述试验,脑室注射Compound C后继续空腹1小时,采集样品。试验结果显示:DEX显著降低了肉仔鸡8日龄和9日龄日增重;与对照组相比,地塞米松处理显著上调了肉鸡下丘脑AMPKα2、LKB1、NPY以及m TOR基因表达,但后期中枢注射Compound C明显降低肉仔鸡下丘脑mTOR基因表达;与对照组相比,脑室注射Compound C显著降低了应激状态下肉鸡下丘脑AMPK总蛋白及磷酸化水平水平;与对照组相比,地塞米松处理显著降低了mTOR蛋白的磷酸化水平,后期中枢注射Compound C同样明显降低mTOR蛋白的磷酸化水平。由此可知,应激状态下中枢注射Compound C明显的降低采食量持续到1小时;应激激活下丘脑AMPK,但后期中枢注射Compound C明显抑制AMPK活性,并且通过AMPK-mTOR信号通路调控机体能量代谢。日粮不同能量水平对肉鸡食欲及中枢AMPK的影响。选取1日龄的雄性AA肉仔鸡216只,随机分为3个处理组(6个重复/12只鸡):低能日粮组(2900 kcal/kg)、正常日粮组(3200 kcal/kg)、高能日粮组(3500 kcal/kg);饲喂至21日龄各个重复取2只采集血浆及下丘脑样品。试验结果显示:低能日粮组平均日采食量明显高于其他两组,高能日粮组平均日增重明显高于其他两组;与对照组相比,高能日粮组和低能日粮组血浆中UREA的含量明显升高,其中低能日粮组含量最高;与高能日粮组相比,低能日粮处理显著升高了肉仔鸡血浆中TG含量;此外,高能日粮和低能日粮均显著降低了21日龄肉仔鸡脾脏指数;高能日粮处理显著下调肉仔鸡下丘脑LKB1、NPY、CCK、GR基因表达;与对照组相比,低能日粮显著上调肉仔鸡下丘脑AMPKα2基因表达;与高能日粮组相比时,低能日粮处理显著上调21日龄肉仔鸡下丘脑AMPKα1基因表达。综上所述,饲喂高能日粮时,肉鸡中枢AMPK信号通路被抑制,NPY表达量下降;饲喂低能日粮时,激活中枢AMPK,通过AMPK信号通路调控机体能量平衡。日粮不同能量水平对应激肉鸡食欲及AMPK信号通路的影响。选取体重相近1日龄雄性AA肉仔鸡216只,随机分为6个处理组(3个重复/12只):低能日粮*DEX组,正常日粮*DEX组,高能日粮*DEX组;低能日粮*Con组,正常日粮*Con组,高能日粮*Con组。14日龄与28日龄早上8:00 DEX组皮下注射地塞米松,对照组注射等剂量的生理盐水,连续注射3天。试验结果显示:在相对生长高峰期,无论饲喂何种日粮,糖皮质激素处理均显著提高肉鸡下丘脑LKB1、AMPKα1和GR基因表达量。在绝对生长高峰期,糖皮质激素使正常日粮组和高能日粮组肉鸡下丘脑LKB1、NPY基因表达量显著升高;同时,DEX处理显著降低能日粮组肉鸡下丘脑ACC总蛋白及磷酸化水平,显著提高正常日粮组肉鸡下丘脑AMPK磷酸化蛋白水平。综上所述,相对生长高峰期,DEX对LKB1-AMPK信号通路的影响不受日粮类型的影响,促食神经肽的表达受日粮类型的影响;绝对生长高峰期,DEX对LKB1-AMPK-ACC信号通路、促食神经肽的影响均受日粮类型的影响。综上所述,应激显著影响肉仔鸡食欲,并且激活中枢LKB1-AMPK-ACC信号通路;中枢AMPK信号通路确实参与了应激对家禽食欲及能量代谢的调控。外周GCs使整个生长阶段食欲均受日粮类型的影响,而中枢AMPK信号通路的变化依赖于生长阶段。