索拉非尼对不同人肝癌细胞株中B7-H3和B7-H4蛋白表达的影响

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目的:研究索拉非尼在HepG2、Hep3B、BEL-7402、BEL-7404、BEL-7405、QGY-7701、QGY-7703、SMMC-7721、MHCC97H、MHCC97L、HCCLM3和HCCLM6等12种最常见的人肝癌细胞株中对B7蛋白家族的B7-H3蛋白和B7-H4蛋白表达的影响。方法:(1)对12种肝细胞癌细胞株(HepG2、Hep3B、BEL-7402、BEL-7404、BEL-7405、QGY-7701、QGY-7703、SMMC-7721、MHCC97H、MHCC97L、HCCLM3、HCCLM6)和正常肝细胞株(HL-7702)进行细胞培养并通过免疫印迹法(western blot,WB)观察这12种最常见的人肝癌细胞株和正常人肝细胞株中B7-H3和B7-H4蛋白的表达情况,并在结果中筛选出具有B7-H3和B7-H4蛋白高表达的细胞株;(2)对它们使用不同剂量的索拉非尼后,使用MTT比色法和WB法分别检测这些筛选出来的细胞株中B7-H3和B7-H4蛋白的表达情况,从而进一步了解索拉非尼对不同人肝癌细胞株的抑制作用以及B7-H3和B7-H4蛋白在不同的人肝癌细胞株中过表达是否常见。(3)采用SPSS 21.0统计学软件(IBM,USA)和GraphPad Prism 5进行统计分析和图形显示,计量资料采用均数±标准差(±s)表示。数据比较分析采用单因素方差分析后,再通过事后分析(Dunnett检验)进一步比较分析不同组间的差异。结果:(1)常见的12种人肝癌细胞株中B7-H3蛋白和B7-H4蛋白表达较正常人肝细胞株(HL-7702)明显上调(P<0.01)。(2)索拉非尼对B7-H3蛋白和B7-H4蛋白过表达最为明显的Hep3B、BEL-7404、MHCC97H、HCCLM3和HCCLM6等5种肝癌细胞株的细胞毒活性IC50值分别14.56μM、9.14μM、9.46μM、17.21μM和9.29μM。(3)在分别使用5μM、10μM和20μM剂量的索拉非尼处理48小时过后,Hep3B、BEL-7404、MHCC97H、HCCLM3和HCCLM6肝癌细胞株中的B7-H3和B7-H4蛋白表达均较对照组发生显著下调(P<0.01)。结论:B7-H3蛋白和B7-H4蛋白在不同的人肝癌细胞株中通常是过表达,在Hep3B、BEL-7404、MHCC97H、HCCLM3和HCCLM6等5种人肝癌细胞株中过表达最为明显;不同剂量的索拉非尼均可致此5种肝癌细胞株中的B7-H3及B7-H4蛋白表达发生了显著下调,它们可能会给将来肝癌发生的预防以及肝癌的靶向治疗提供一个潜在的新靶点
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