目的：构建血管生成素-1基因真核表达载体pSecTag2B-Ang-1，通过脂质体介导瞬时转染到HEK293细胞中，并检测其Ang-1mRNA及蛋白表达水平，为下一步冠心病的基因治疗提供实验基础。方法：根据已知人的Ang-1cDNA序列，设计引物。以人心脏cDNA文库的质粒DNA为模板扩增Ang-1cDNA，并行琼脂糖凝胶电泳检测。扩增出的目的基因通过回收、纯化和酶切后与真核表达载体连接，再转化到感受态大肠杆菌DH5α，并在含氨苄青霉素的培养皿中挑选阳性菌落，提取阳性克隆重组质粒经酶切和基因测序进行鉴定。通过脂质体介导将构建正确的重组质粒转染到HEK293细胞中，实验分为两组：转染重组质粒的HEK293细胞作为实验组，未转染重组质粒的HEK293细胞作为对照组。通过实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time Quantitative PCR Detecting System, QPCR)、蛋白质免疫印迹(WesternBlot, WB)方法检测其Ang-1mRNA及蛋白表达水平。结果：成功构建血管生成素-1基因真核表达载体。将构建正确的重组质粒在脂质体介导下转染到HEK293细胞中，经QPCR方法检测示实验组较对照组中Ang-1mRNA的表达水平明显升高（p<0.05）。Western Blot方法检测示实验组较对照组中Ang-1蛋白表达水平显著性增高（p<0.05）。本实验结果显示转染重组质粒的HEK293细胞能高效并稳定地表达Ang-1mRNA和蛋白质。结论：1）成功构建血管生成素-1基因真核表达载体。2）转染重组质粒的HEK293细胞能高效并稳定地表达Ang-1mRNA和蛋白质。