论文部分内容阅读
医学检验技术在疾病预防与诊断中具有重要作用，而基于纳米颗粒的功能性分子展示技术为医学检验提供强大的技术手段，能够实现对低丰度检测指标的检验。目的：以乙型肝炎病毒（HBV）病毒样纳米颗粒和铁蛋白笼形结构纳米颗粒为研究对象，将检测相关的功能性分子分别展示在这两种纳米颗粒上，构建出可用于超灵敏检测的功能性纳米颗粒复合结构；并将其应用到Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）的P24抗原蛋白的分子检测，实现对其的高灵敏度检测。方法：主要采用分子生物学的手段，将能够与抗体广谱性结合的金黄色葡萄球菌Protein G（SPG）展示在HBV病毒样纳米颗粒上，构建出具有抗体广谱性结合能力的HBV病毒样纳米颗粒复合体，并将其应用到HIV-1的P24抗原蛋白酶连免疫吸附分析（ELISA）检测中，检验其相对的检测灵敏度；将生物素结合肽（BAP）展示在铁蛋白笼形结构纳米颗粒上，并经生物素化，构建出具有链霉亲和素特异性结合能力的铁蛋白笼形纳米颗粒复合体，并将其应用到HIV-1的P24抗原蛋白的ELISA检测中，检验其相对的检测灵敏度。结果：成功的构建出具有抗体广谱性结合能力的HBV病毒样纳米颗粒复合体，并将其应用到HIV-1的P24抗原检测中，其检测下限能够达到1ng/mL，较商业HIV-1P24ELISA试剂盒检测下限10ng/mL，检测灵敏度具有显著提高；成功的构建出具有链霉亲和素特异性结合能力的铁蛋白笼形纳米颗粒复合体，并将其应用到HIV-1的P24抗原检测中，其检测下限能够达到1ng/mL，较商业HIV-1P24ELISA试剂盒检测下限10ng/mL，检测灵敏度具有显著提高。结论：研究中成功建立了基于HBV病毒样纳米颗粒及铁蛋白笼形结构纳米颗粒的分子展示技术平台，并将检测关联性的SPG和生物素分别展示在HBV病毒样纳米颗粒及铁蛋白笼形结构纳米颗粒上，实现了对HIV-1P24抗原的超灵敏检测，较商业标准化ELISA检测灵敏度具有显著提高。