苹果花芽孕育的蛋白质组学及其特异蛋白的研究

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苹果是世界上最重要有经济价值的果树之一,可是苹果育种和其它木本植物一样一直落后于其它作物,最主要的一点是存在着童期长的问题。如能搞清果树花芽分化机理,就能有效地启动成花控制基因,缩短果树童龄期,加速果树育种进程,所以果树花芽分化研究历来是果树生理学的重要研究内容。以同砧木同品种、不同品种的、同时停长的苹果短枝和不同发育阶段的杂交种实生树为材料,分别从形态解剖学、内源激素水平、可溶性蛋白含量以及不同发育阶段、不同器官的特异蛋白双向电泳分析,运用蛋白质组学研究技术(双向电泳技术,生物质谱技术、生物信息学技术)对苹果花芽孕育的机理进行了研究。研究结果如下: 1.苹果芽中富含多酚类化合物、色素及其氧化产物,严重干扰双向电泳技术的应用,通过苹果短枝顶芽蛋白质样品制备、电泳及染色等方面的技术改进,探索出了一种可获得重复性好,清晰度高的蛋白质双向电泳图谱技术;电泳图谱可分辨出苹果树短枝顶芽蛋白质斑点数765个左右,苹果短枝顶芽蛋白质的相对分子量约在13.0kD~178.0kD范围内,主要分布在13.0kD~79.0kD之间。等电点约在4~9.5范围内。 2.对红富士、金冠苹果和“红富士×金冠”杂交种实生树短枝停长后3—9周的花芽、叶芽进行蛋白质双向电泳研究。结果表明,7周的2-DE图谱比较,分别有283个蛋白点在表达上有明显的质和量的变化。其中:162个蛋白点在花芽形态分化后2-DE图谱中的表达量均高于花芽形态分化前,110个蛋白点的表达量低于花芽形态分化前;4个蛋白点(16.4、30.2、40.3、65.1kD)为花芽形态分化开始时初前(花序原始体出现)花芽2-DE图谱所特有;3个蛋白点(39.3、60.2、66.3kD)为初后(侧花出现)花芽2-DE图谱所特有,1个蛋白点(77.1kD)为萼片期花
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