随着高效液相色谱（HPLC）在分析领域的应用范围越来越广,其色谱填料的发展也日益引起国内外研究者的关注。目前,HPLC普遍使用的是硅胶色谱填料,但由于其具有适用的pH值范围窄（pH值为3-10）及对碱性化合物不可逆吸附等缺点,相较而言,钛胶色谱填料具有很好的化学稳定性、机械稳定性和热稳定性。例如,钛胶在pH值1-14范围都能够稳定存在;对碱性化合物具有很好的分离效果;可与含羟基、磷酸、羧酸等基团的化合物进行结合;且钛胶色谱柱在升高温度时具有较低的柱压,有利于化合物的分离分析。由于这些优于硅胶色谱柱的特点,近年来钛胶作为色谱填料,吸引了众多的国内外学者对其进行研究。维生素对于维护人体健康、预防及治疗多种疾病都有着重要的作用,虽然粮食、水果和蔬菜等食物中含有维生素,但目前出现了越来越多补充维生素的食品及保健品,因此对于维生素含量的分析与测定具有重要意义。钛胶反相色谱柱对维生素的分析未见报道,本文研究了反相钛胶色谱柱在分析水溶性维生素方面的应用。本课题的内容包括三部分:（1）建立了钛胶反相色谱柱对维生素B₁的测定方法。研究了维生素B₁的保留行为与甲醇含量、柱温和流速的关系,得出最优色谱条件:检测波长265 nm,磷酸缓冲盐pH值7.0,浓度5.0 mmol/L,甲醇65%,柱温30℃,流速1.0 mL/min。线性范围为0.083-125μg/mL（R²=0.9998）;检出限为0.025μg/mL;相对标准偏差（n=8）为0.56%;加标回收率范围为95.46%-105.40%。（2）建立了高效液相色谱法同时测定维生素B₂和维生素B₅含量的检测方法。研究了两种维生素的保留行为与磷酸缓冲盐浓度、柱温和流速的关系,得出最优色谱条件:在270 nm检测维生素B₂,在210 nm检测维生素B₅,磷酸缓冲盐pH值2.5,浓度80 mmol/L,柱温50℃,流速0.8 mL/min。分析了两种维生素保留的热力学参数-焓、熵和吉布斯自由能。维生素B₂和维生素B₅线性范围分别为1.0-50.0μg/mL（R²=0.9999）和3.0-150.0μg/mL（R²=0.9998）;维生素B₂和维生素B₅的检出限分别为0.300μg/mL和0.900μg/mL;两种物质的相对标准偏差低于0.22%;加标回收率范围为94.55%-104.06%。方法的精密度和准确度均可满足HPLC法的测定要求。（3）建立了高效液相色谱法同时测定五种维生素:生物素（维生素B₇）、叶酸（维生素B₉）、钴胺素(维生素B₁₂)、烟酸和烟酰胺（统称维生素PP）含量的检测方法。研究了五种维生素的保留行为与磷酸缓冲盐pH、缓冲盐浓度、柱温和流速的关系,得出最优色谱条件:在210 nm检测生物素和钴胺素,270 nm检测烟酸、烟酰胺和叶酸,磷酸缓冲盐pH值7.0,浓度5.0 mmol/L,柱温50℃,流速0.8 mL/min。分析了五种维生素保留的热力学参数-焓、熵和吉布斯自由能。烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素标准曲线线性良好（R²>0.9990）;烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素的检出限分别为0.006μg/mL、0.010μg/mL、0.020μg/mL、0.022μg/mL和0.008μg/mL;五种物质的相对标准偏差均低于1.36%;加标回收率范围为92.30%-107.20%。方法的精密度和准确度均可满足HPLC法的测定要求。