荨麻多糖分离分析、活性及结构研究

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荨麻属植物是一种民族药和民间药,该属植物在我国药用的历史悠久,目前有相关文献报道荨麻(Urtica)是一种常用植物药,其中荨麻多糖具有明显的抗炎作用。因此从天然荨麻提取物中分离、纯化荨麻多糖并对其进行深入研究具有重要的意义和价值。在本课题中,我们选择荨麻(Urtica fissa)作为研究对象,具体作了以下几方面研究:对不同产地的荨麻提取物的多糖含量进行比较,结果显示贵州荨麻的多糖含量最高。在我们先前实验室制备荨麻多糖的基础上,放大制备样品。将荨麻的根茎首先用乙醇进行预提取以除去有色物质,然后用沸水提取。水提取物用截流分子量为5000的中空纤维微孔膜和泵组成的超滤系统超滤,去除小分子物质,所得的浓缩部分真空冷冻干燥,得到荨麻粗多糖。用硫酸苯酚法测粗多糖的总糖百分含量,用DNS法测还原糖(单糖)的含量,多糖含量计算是以总糖含量减去单糖含量。结果表明多糖是粗提物的主要部分。采用棉球肉芽肿,醋酸扭体和热板法研究了荨麻多糖的抗炎和镇痛作用,实验结果表明荨麻多糖对肉芽肿大鼠具有显著的抑制作用,而对热板法致痛和醋酸致痛的大鼠没有明显的镇痛作用。采用Sevage法对荨麻粗多糖进行除蛋白后,DEAE- Cellulose, DEAE- Sephadex A-25和Sepharose 6B凝胶柱层析法对其进一步纯化,得到四个多糖。其均一性,用电泳,HPLC法分析。对其中纯化的多糖20B,采用1DNMR和2DNMR进一步研究其结构特点。该多糖是由阿拉伯糖,半乳糖,葡萄糖组成。其分子量分别为: Mn 4140, Mw 5118 ,Mz 6356.通过DQF-COSY, TOCSY和HSQC等1H-1H和1H-13C相关谱中的端基质子和碳氢信号分析多糖的组成及连接位置,通过HMBC谱的碳氢相关来判断多糖的连接顺序。多糖的糖链结构可能为:
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