【摘 要】
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RING蛋白在植物生长发育过程中的防御应答及生物胁迫反应起重要的作用。然而,其在非模式植物辣椒属及其他茄科植物中的生物学功能及机制研究的甚少。本研究中,从辣椒均一化cD
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RING蛋白在植物生长发育过程中的防御应答及生物胁迫反应起重要的作用。然而,其在非模式植物辣椒属及其他茄科植物中的生物学功能及机制研究的甚少。本研究中,从辣椒均一化cDNA文库中分离获得一个辣椒基因的cDNA阳性克隆,全长为1386bp,编码371个氨基酸其分子质量为90.90KDa。该基因编码一个假定的C3-H2-C3型RING蛋白,RING结构域位于其C-末端。该RING蛋白与假定的葡萄,蓖麻,大豆,及拟南芥RING蛋白有46%-72%的同源性。因此,命名为CaRING2。构建了 CaRING2与GFP的融合蛋白表达载体,运用基因枪轰击洋葱表皮,发现CaRING2编码的蛋白定位于细胞膜。在辣椒中瞬间表达CaRING2后,台盼蓝染色变深和电导率的升高证明其诱发过敏细胞死亡,同时伴随着H202的累积和防御标记基因表达量的上调,这些基因有SA应答相关的CaSAR82A,基础病理相关的CaBPR1,氧化酶相关的CaPO2,过敏反应诱导相关的CaHIR1,及JA途径相关的CaDEF1的下调。CaRING2在烟草中的超表达后,提高了转基因烟草对青枯菌侵染的抗性,同时过敏应答标记基因NtHSR203,NtHSR515和SA应答基因标记基因NtPR2的转录水平得到上调。相反,病毒相反,病毒诱导的CaRING2沉默辣椒植株增强了对青枯菌的敏感性。结果表明,CaRING2在辣椒免疫应答中起重要的作用。
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